On-bead fluorescent DNA nanoprobes to analyze base excision repair activities.
DNA完整性不断受到内源和外源因素破坏，碱基损伤可引发突变、遗传病和癌症。生物体通过碱基切除修复（BER）等途径特异性修复无碱基位点、烷基化、氧化及脱氨基损伤。本文报道一种基于磁性微珠的荧光DNA纳米探针功能测定方法，用于检测BER酶活性。探针为发夹形寡核苷酸，3′端经生物素固定于链霉亲和素包被的磁性微珠，5′端标记Cyanine3...
Label-free fluorescence assay for thrombin based on unmodified quantum dots.
凝血酶及其抑制剂的快速、灵敏检测对疾病诊断和药物研发具有重要意义。本文报道了一种基于未修饰 CdTe 量子点（QDs）聚集行为的新型生物传感器，用于检测凝血酶活性及其抑制。凝血酶的阳离子底物肽 S-peptide（GGLVPRGSCC-NH2）可通过巯基结合到 CdTe QDs 表面，部分中和其表面负电荷，诱导 QDs 聚集，导致荧...
A gold nanoparticle-enhanced fluorescence polarization biosensor for amplified detection of T4 polynucleotide kinase activity and inhibition.
本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）荧光偏振增强效应和λ核酸酶（λ exo）切割反应的荧光偏振（FP）纳米传感器，用于检测T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性及其抑制。该传感器以3'端修饰AuNPs的DNA发夹探针为T4 PNK底物，在ATP存在下，T4 PNK将DNA 5'-羟基磷酸化，λ exo随即切割5'-磷酸化末端，...
Activity-based DNA-gold nanoparticle probe as colorimetric biosensor for DNA methyltransferase/glycosylase assay.
本文报道了一种基于活性基团探针（ABP）的比色生物传感器平台，用于检测具有活性的 DNA 甲基转移酶/糖基化酶。该传感器利用 DNA-金纳米颗粒（AuNP）探针，通过目标酶对 ABP 的机制性共价捕获，使固定在 AuNP 表面的 DNA 探针末端受到保护，从而抵抗外切酶 I 和 III（Exo I/III）的降解。由于 DNA 修饰...
Sensitive nanochannel biosensor for T4 polynucleotide kinase activity and inhibition detection.
5′-多聚核苷酸激酶是一类关键酶，可催化具有5′-羟基末端的核酸磷酸化，参与DNA损伤修复等细胞事件。T4多聚核苷酸激酶（PNK）在细胞核酸代谢和DNA损伤应答中发挥重要作用，其活性与抑制状态影响核酸调控。本文报道一种新型纳米通道生物传感器，用于监测PNK的活性与抑制。该传感器基于功能化纳米通道系统和λ外切酶偶联切割反应：生物素标记...
Phospholipid-graphene nanoassembly as a fluorescence biosensor for sensitive detection of phospholipase D activity.
本文报道了一种基于磷脂在非氧化石墨烯表面自组装形成的磷脂-石墨烯纳米组装体。该组装体通过脂质尾部与石墨烯之间的非共价疏水作用制备，不破坏石墨烯片层内的电子共轭结构，因而保留其优良电学与光学性能，同时磷脂包覆赋予其良好生物相容性、易溶性和可控表面修饰能力。结构表征表明，还原氧化石墨烯片层被磷脂双层包裹，形成平面细胞膜模拟物。利用荧光素...
Non-linear and linear enhancement of enzymatic reaction kinetics using a biomolecule concentrator.
本研究在纳流体生物分子浓缩芯片中考察浓度增强型酶活性检测，用于从细胞裂解液及其他低体积、低浓度样品中检测和研究极低丰度酶。作者建立了一种操作模式的数学模型：酶与底物被共同浓缩到芯片上的液塞中，导致反应速率非线性增强。模型预测并实验验证了两个反应阶段：初始二次方酶限制阶段和后期线性底物限制阶段。结果表明，在多数实际情况下反应最终进入底...
A biosensor for the determination of β-galactosidase activity: a different viewpoint on biosensors.
β-半乳糖苷酶可将乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，因其在医学、食品和环境领域具有生物技术价值，作者提出一种用于监测β-半乳糖苷酶活性的生物传感器体系。该传感器以玻璃碳电极为基底，通过戊二醛交联固定葡萄糖氧化酶，并电聚合苯胺形成稳定层；在0.05 M柠檬酸缓冲液（pH 4.8）中，利用铁氰化钾介导检测乳糖水解产生的葡萄糖。循环伏安法和电化学...
A dual surface plasmon resonance assay for the determination of ribonuclease H activity.
本研究报道了一种用于监测核糖核酸酶H（RNase H）活性的双通道表面等离子共振（SPR）检测方法。该方法利用多通道SPR生物传感器，在同一流路中设置两个独立功能化传感区：上游传感区固定含RNA底物和DNA尾的嵌合寡核苷酸探针，用于实时监测RNase H对RNA链的切割；下游传感区固定特异性DNA探针，用于捕获切割反应释放的片段。通...
Enzyme biosensor based on NAD-sensitive quantum dots.
本文报道了一种基于量子点（QDs）的新型酶生物传感器，利用 QDs 荧光强度变化检测乳酸脱氢酶（LDH）活性。该体系以 LDH 的辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）作为荧光响应物：NAD 首先与 QDs 作用并猝灭其荧光；当加入 LDH 后，LDH 催化生物反应消耗 NAD，使 QDs 荧光随 LDH 活性增加而恢复并增强。实验获得...
Rapid analysis of matrix metalloproteinase-3 activity by gelatin arrays using a spectral surface plasmon resonance biosensor.
我们开发了一种基于阵列的光谱表面等离子共振（SPR）生物传感器检测系统，用于高通量分析基质金属蛋白酶（MMP）-3 活性。通过在胺修饰金阵列上固定 MMP-3 底物明胶制备明胶阵列，并通过监测明胶蛋白水解引起的 SPR 波长偏移来测定 MMP-3 活性。SPR 光谱、原子力显微镜和荧光蛋白阵列验证了 MMP-3 的明胶酶活性，该活性...
Strategy to fabricate an electrochemical aptasensor: application to the assay of adenosine deaminase activity.
本文提出一种构建电化学生物传感器（适配体传感器）的新策略，并将其用于腺苷脱氨酶（ADA）活性检测。ADA 可催化腺苷脱氨生成肌苷，在淋巴系统分化成熟中起重要作用，其缺乏与严重联合免疫缺陷病相关，过表达则与溶血性贫血有关。作者设计了一条含腺苷适配体区、G-四链体半区和连接区的寡核苷酸作为核心元件，并通过杂交固定于金电极表面。检测时，腺...
Sensing purine nucleoside phosphorylase activity by using silver nanoparticles.
本文报道了一种用于测定嘌呤核苷磷酸化酶（purine nucleoside phosphorylase, PNP）活性的电化学生物传感器。由于修饰在电极表面的银纳米颗粒（Ag NPs）能够促进鸟苷（guanosine）和鸟嘌呤（guanine）的电子转移反应性，这些物质的电化学响应可清晰反映 PNP 的酶活性。该电化学生物传感器具有...