Vanillin Activates Human Bitter Taste Receptors TAS2R14, TAS2R20, and TAS2R39.
香草是世界上最常用的食品香料之一，香草醛（vanillin）是加工香草中的主要成分，通常赋予食品甜香，但也可在较高浓度下产生苦味。此前香草醛苦味的分子机制尚不清楚。本研究在体外检测缓冲液中配制香草醛，并对全部 25 个已知人类苦味受体 TAS2R 进行功能检测。结果显示，香草醛以浓度依赖方式激活 TAS2R14、TAS2R20 和 ...
High-resolution detection of ATP release from single cultured mouse dorsal horn spinal cord glial cells and its modulation by noradrenaline.
本研究将稳定转染大鼠P2X2受体亚基的人胚胎肾293细胞（HEK293-P2X2）与200 nM孕酮（PROG）预孵育，构建HEK293-P2X2-PROG嗅探细胞/生物传感器。PROG是同源P2X2受体的强效正变构调节剂，可显著提高细胞对低纳摩尔胞外ATP的检测能力。将负载Fura-2的HEK293-P2X2-PROG细胞急性铺于...
Multiple pathways for elevating extracellular adenosine in the rat hippocampal CA1 region characterized by adenosine sensor cells.
脑内细胞外腺苷调节多种生理和病理过程，其动态变化复杂，反映昼夜节律、神经活动、代谢和疾病状态。由于缺乏简单可靠地测量组织腺苷时间依赖分布的方法，其动态机制尚未完全理解。本研究开发了一种名为腺苷传感器细胞的生物传感器，该细胞表达腺苷A1受体和基因改造G蛋白Gqi5，通过检测腺苷引起的细胞内钙升高来表征脑组织细胞外腺苷升高。将腺苷传感器...
Biosensor cell assay for measuring real-time aldosterone-induced release of histamine from mesenteric arteries.
本研究旨在建立一种实时检测组胺释放的方法，并检验醛固酮孵育是否能诱导离体灌注小鼠肠系膜动脉释放组胺。作者以负载 Fura-2 钙指示剂、稳定转染小鼠组胺 H1 受体的 HEK-293 细胞（HEK-H1）作为生物传感器，通过荧光成像监测细胞内 Ca2+ 瞬变峰值，从而间接反映组胺对 H1 受体的激活。结果显示，该生物传感器对生理相关...
Metabolomics meets functional assays: coupling LC-MS and microfluidic cell-based receptor-ligand analyses.
代谢组学已成为研究生物过程的重要工具，但仅获得代谢物谱而缺乏相应生物活性信息，对理解生物学过程的价值有限。本研究旨在将液相色谱-质谱（LC–MS）代谢组学与基于细胞的受体-配体检测相结合，以发展功能代谢组学方法。作者开发了一种流动式生物传感器，利用稳定表达人瞬时受体电位香草素亚型1（TRPV1）钙离子通道和荧光胞内钙报告蛋白 YC3...
Bitter taste receptor T2R1 activities were compatible with behavioral sensitivity to bitterness in chickens.
阐明鸡的味觉机制可为鸡饲料的创制与改良提供依据，因为口腔组织中味觉受体的特性会影响动物采食行为。本研究聚焦鸡对苦味的敏感性。作者从鸡腭组织克隆苦味受体 T2R1，构建多种表达鸡 T2R1（cT2R1）的生物传感器细胞，并筛选出其中对苦味配体响应最灵敏的 cT2R1 生物传感器。采用钙离子成像方法，鉴定出两种 cT2R1 激动剂：右美...
Leptin's effect on taste bud calcium responses and transmitter secretion.
瘦素是由脂肪组织释放的肽类激素，主要作用于下丘脑控制食欲，也可降低对甜味物质的味觉反应，但其在味觉转导级联中的作用部位尚不清楚。本研究检测瘦素对孤立小鼠味蕾甜味诱发反应和神经递质释放的影响。结果表明，瘦素使孤立小鼠味蕾中甜味诱发的钙动员中度降低。作者进一步利用表达5-HT2c和P2X2/X3受体以及内源P2Y受体的中国仓鼠卵巢（CH...
Activation of the endoplasmic reticulum calcium sensor STIM1 and store-operated calcium entry by rotavirus requires NSP4 viroporin activity.
轮状病毒非结构蛋白4（NSP4）显著改变细胞钙稳态：增加内质网（ER）通透性、降低ER钙库并激活质膜（PM）钙内流通道，使胞质钙升高2至4倍。胞质钙升高是病毒复制必需，但钙内流机制不清。NSP4是ER定位病毒孔蛋白，其活性耗竭ER钙并导致钙内流。作者假设NSP4介导的ER钙耗竭通过激活ER钙传感器STIM1而激活store-oper...
Dissociated neuronal culture expressing ionotropic odorant receptors as a hybrid odorant biosensor--proof-of-concept study.
人工气味传感器在灵敏度、选择性和可检测气味种类方面通常不及生物嗅觉系统，而生物系统的优异性能依赖于气味受体的分子识别及其后的神经元信息处理。本文提出一种新型混合气味生物传感器，将昆虫离子型气味受体表达于啮齿动物离体神经元培养物中。该策略兼具功能表达容易、使用寿命较长以及可放大弱离子电流等优势。研究通过脂质体转染，在大鼠皮层神经元-胶...
Mechanisms of constitutive and ATP-evoked ATP release in neonatal mouse olfactory epithelium.
本研究探讨新生小鼠嗅上皮中ATP的组成性释放与ATP诱导释放机制。采用荧光素-荧光素酶发光法定量ATP释放，并用共聚焦成像观察荧光ATP标记物quinacrine标记的囊泡ATP释放。结果显示，生理条件下ATP通过胞吐、半通道和ABC转运体组成性释放，可被艰难梭菌毒素A和丙磺舒抑制；ADP经P2Y受体和cAMP/PKA通路负向调节组...
Real-time detection of acetylcholine release from the human endocrine pancreas.
神经元、感觉细胞和内分泌细胞通过分泌神经递质和激素进行细胞间通讯，并协调器官与系统功能。要确认某物质是特定细胞使用的细胞外信号分子，必须直接证明其被分泌。本方案介绍利用生物传感器细胞实时检测内分泌细胞释放神经递质的方法。采用稳定表达毒蕈碱型乙酰胆碱受体 M3 的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞作为 ACh 生物传感器，负载 Ca2+ 指示...
Development of a microfluidic cell-based biosensor integrating a millisecond chemical pulse generator.
细胞基生物传感器的应用常受细胞表面受体在激动剂持续刺激下发生脱敏的限制。本文报道了一种用于液体环境中检测三磷酸腺苷（ATP）的微流控细胞基生物传感器（μCBB）。该传感器集成了毫秒级化学脉冲发生器，并以单个表达内源性 P2Y 受体的 NIH-3T3 细胞作为识别元件。研究采用 ATP 溶液模拟输入信号，通过控制十字形微流控芯片两个出...
Released nucleotides amplify the cilium-dependent, flow-induced [Ca2+]i response in MDCK cells.
目的：灌流液流动变化可升高肾上皮细胞内钙浓度，培养肾上皮细胞需初级纤毛感知细微流动变化；在灌流肾小管中该流动反应由核苷酸经P2Y2受体介导，但机械应力作用于初级纤毛是否释放核苷酸尚不清楚。本研究检测纤毛依赖的流动反应中是否释放核苷酸并参与流动诱导的钙信号。方法：MDCK细胞装载Fluo-4-AM，在37℃半开放单室或封闭双室灌流系统...
Norepinephrine is coreleased with serotonin in mouse taste buds.
ATP和5-羟色胺（5-HT）分别由味蕾受体细胞（II型）和突触前细胞（III型）分泌，去甲肾上腺素（NE）也被认为是味蕾中的神经递质或旁分泌激素，但其释放刺激和分泌细胞类型尚不清楚。本研究将中国仓鼠卵巢细胞（CHO）稳定转染α1A肾上腺素能受体并装载fura-2，构建NE生物传感器，用于检测孤立小鼠味蕾和味觉细胞释放的NE。NE生...