Journal of visualized experiments : JoVE
2014
Fleming MR, Shamah SM, Kaczmarek LK
离子通道通过选择性允许离子跨膜流动控制神经元等可兴奋细胞的电特性。为调节神经元兴奋性,信号蛋白和分子会改变离子通道的生物物理性质,并常与通道结合形成异源通道复合物。传统检测通道与调节蛋白相互作用的实验需要外源标记,可能改变蛋白行为并降低生理相关性,且难以提供活细胞中相互作用的时间过程信息。光学生物传感器(如X-BODY Biosci...
Journal of biomolecular screening
2012
Antczak C, Mahida JP, Bhinder B, Calder PA 等 5 人
激酶抑制剂的成功验证了其作为药物的价值,但发现过程因候选物缺乏细胞活性而失败率高。作者认为在活细胞中筛选可发现具有细胞渗透性的新型调节剂。为此,他们使用近期优化的表皮生长因子受体(EGFR)生物传感器检测法筛选 EGFR 活性调节剂。该检测法在 384 孔高通量筛选(HTS)条件下得到验证,信噪比为 21,Z′ 值为 0.56,表明...
ACS chemical biology
2011
Binkowski BF, Butler BL, Stecha PF, Eggers CT 等 11 人
环磷酸腺苷(cAMP)是G蛋白偶联受体(GPCR)激活后信号转导的关键第二信使。研究Gs偶联受体时,需要一种能够连续监测cAMP浓度动力学变化并覆盖较宽动态范围的检测手段。为此,作者通过进化改造了一种cAMP发光生物传感器,使其更好地覆盖活细胞中存在的生理浓度范围。与免疫分析相比,进化后的生物传感器构型能够以更低劳动强度的格式准确追...
PloS one
2011
Kuo YC, Ho JH, Yen TJ, Chen HF 等 5 人
表面等离子共振(SPR)生物传感器因对测试对象折射率变化高度敏感,已成为实时动态分析分子结合亲和力的有用工具。传统分子生物学方法评估细胞分化通常需要细胞裂解或固定,难以在活细胞中进行,且需要一定数量细胞以获得足够蛋白或信使RNA用于检测。为克服该局限,作者开发了一种基于SPR的生物传感装置,利用特定抗原-抗体结合引起的细胞表面光学性...
Trends in biotechnology
2011
Wang Y, Li Z, Wang J, Li J 等 5 人
石墨烯是零维富勒烯、一维碳纳米管和三维石墨的基本构建单元。石墨烯具有独特的平面结构以及新颖的电子性质,因而受到科学家的广泛关注。本综述选择性分析了石墨烯生物应用领域的当前进展。特别是,详细总结了用于生物应用的石墨烯生物功能化、利用石墨烯或石墨烯基纳米材料开发基于荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器,以及石墨烯或石墨烯基纳米材料在...
Analytica chimica acta
2010
Rui Q, Komori K, Tian Y, Liu H 等 6 人
本文报道了一种基于氧化锌(ZnO)纳米片的电化学生物传感器,用于检测活体癌细胞释放的过氧化氢(H2O2)。通过一步电沉积制备六角形ZnO纳米片薄膜,并将细胞色素c(cyt. c)直接固定于其表面。紫外-可见光谱和电化学结果表明,ZnO纳米片可为cyt. c提供生物相容界面,使其保持固有生物活性;cyt. c在纳米ZnO表面的形式电位...
Nature nanotechnology
2009
Heller DA, Jin H, Martinez BM, Patel D 等 11 人
纳米传感元件有望在物理或生物受限环境中实现单分子分析物检测。单壁碳纳米管(SWNT)作为光学传感器具有光稳定近红外发射、可穿透生物介质及单分子灵敏度等优势。分子吸附可通过扰动纳米管电子结构转换为光学信号。本文证明一对 SWNT 物种((6,5) 和 (7,5))可提供至少四种可调制模式,通过分析物对发射带强度或波长的改变程度对试剂进...
Antimicrobial agents and chemotherapy
2009
Sabariegos R, Picazo F, Domingo B, Franco S 等 6 人
丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A 蛋白酶在病毒复制中起关键作用。本研究报道了一种用于在单个活哺乳动物细胞中监测该酶活性的荧光共振能量转移(FRET)探针。该探针由增强青色荧光蛋白(ECFP)与 citrine(增强黄色荧光蛋白变体)融合而成,二者之间的连接肽中嵌入 HCV NS3/4A 蛋白酶切割位点。在哺乳动物细胞中表达该生物传...
ACS chemical biology
2008
Hodgson L
新型基因编码生物传感器利用改造的萤火虫荧光素酶,有望在活细胞中显著提升信噪比与响应动态范围。该类传感器在关闭状态下通过铰链结构阻碍荧光素酶与底物荧光素结合,仅在蛋白活性状态触发构象闭合时催化荧光素氧化并发光,从而获得接近零背景与数倍至二十倍以上的信号变化。由于响应特性优异,其特别适用于大孔板格式的高通量筛选,并可通过替换蛋白酶识别序...
The Journal of biological chemistry
2007
Ma L, Wang HY
非经典 Wnt/环磷酸鸟苷/钙离子/NF-AT 通路经由 G 蛋白偶联受体 Frizzled-2 发挥作用。作者在小鼠 F9 畸胎瘤胚胎细胞中扫描 Wnt5a 激活 Frizzled-2/Gβt2/PDE6 后的下游事件,发现丝裂原活化蛋白激酶 p38(MAPK p38)被强烈激活。p38 激活对 Frizzled-2 介导的 NF...