丙型肝炎病毒（HCV）NS3/4A 蛋白酶在病毒复制中起关键作用。本研究报道了一种用于在单个活哺乳动物细胞中监测该酶活性的荧光共振能量转移（FRET）探针。该探针由增强青色荧光蛋白（ECFP）与 citrine（增强黄色荧光蛋白变体）融合而成，二者之间的连接肽中嵌入 HCV NS3/4A 蛋白酶切割位点。在哺乳动物细胞中表达该生物传...
实时、高选择性和高灵敏度的多核苷酸检测方法具有重要的科学与经济价值。基于荧光共振能量转移（FRET）的检测方法利用水溶性共轭聚合物（CP）的集体响应和水相聚电解质自组装特性，已广泛用于DNA、RNA、蛋白质和小分子检测。CP基生物传感器的检测灵敏度取决于激发CP时染料发射相对于直接激发染料时的信号放大。本文以阳离子聚芴衍生物和荧光素...
实时、非侵入地测定活细胞内葡萄糖浓度对研究葡萄糖转运、磷酸化及2型糖尿病和肥胖机制具有重要意义。作者此前基于大肠杆菌葡萄糖结合蛋白（GBP）构建了葡萄糖指示蛋白（GIP），通过葡萄糖结合诱导构象变化改变荧光共振能量转移（FRET）效率实现连续监测。然而，GIP 中使用的荧光蛋白对 pH 敏感，尤其酸性环境中性能下降，而细胞内 pH ...
基于 Förster 共振能量转移（FRET）的生物传感器可用于定量分析细胞内信号，包括环腺苷酸（cAMP）监测，受到广泛关注。串联生物传感器在供体激发波长下测量供体/受体发射比是常用方法，但该比值不仅随 cAMP 浓度变化，还会受离子环境或其他影响荧光蛋白折叠概率的因素影响。本文采用基于两种激发波长的光谱 FRET 分析方法，利用...
本文报道了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的多重连接依赖性探针扩增（MLPA）产物检测方法，用于扩展MLPA的诊断能力并展示其与微阵列结合检测多种突变的可能性。作者设计了一种夹心杂交体系：将3'端标记受体型染料Alexa Fluor 555（AF555）的固定化探针通过生物素-链霉亲和素作用固定于磁珠上，使其与特定MLPA PC...
本研究基于荧光共振能量转移（FRET）构建了 caspase-7 生物传感器 vDEVDc，用于研究细胞凋亡执行蛋白酶 caspase-7 的蛋白水解特性。vDEVDc 由 ECFP 供体、含 DEVD 识别序列的 24 氨基酸连接肽和 Venus 受体组成。N 端缺失 56 个残基的活性同工型 57casp7 可在识别序列处切割 ...
荧光共振能量转移（FRET）结合荧光蛋白是检测细胞内蛋白相互作用、酶活性和小分子的重要方法。受一种新型紫激发黄色荧光蛋白的启发，作者开发了基于双FRET的caspase-3生物传感器。由于两套FRET对具有明显不同的激发光谱，每个FRET生物传感器在另一个存在时均可进行比率成像。文中报道了通过定向进化获得的紫激发黄色荧光蛋白mAme...
本研究开发了一种基于毛细管的光学生物传感器，用于检测牛肉嫩度指标钙蛋白酶抑制素（calpastatin）。从11头牛背最长肌中分别于死后0 h和48 h取样，样品经提取后，用传统实验室方法测定calpastatin活性，并用新开发的毛细管生物传感器检测，同时测定Warner–Bratzler剪切力（WBSF）和粗蛋白含量，比较各响应...
本文设计了一种新型组装纳米生物传感器 QDs-ConA-β-CDs-AuNPs，用于血清中葡萄糖的高灵敏、高选择性直接测定。该传感方法基于 CdTe 量子点（QDs）作为能量供体与金纳米颗粒（AuNPs）作为能量受体之间的荧光共振能量转移（FRET）。将刀豆蛋白 A（ConA）偶联的 QDs 与巯基化 β-环糊精（β-SH-CDs）...
本综述概述了功能蛋白质组学中用于研究蛋白定位、蛋白-蛋白相互作用、细胞内信号事件和第二信使生成的当前光学方法。文章讨论了利用荧光蛋白或生物发光蛋白标记的报告基因检测，以及近年来发展的细胞内生物传感器检测、基于流式细胞术的荧光细胞条形码、结合RNA干扰与自动成像的转染细胞微阵列等筛选平台。这些新方法可用于小分子注释、信号事件研究和表型...
大肠杆菌D-半乳糖/D-葡萄糖结合蛋白（GGBP）是一种约32 kDa的单体蛋白，其结构由两个主结构域和铰链区组成，糖结合位点位于两个结构域之间的裂隙中，能以微摩尔级亲和力结合葡萄糖。本文报道利用GGBP第182位氨基酸突变体作为荧光探针，构建非消耗型葡萄糖荧光生物传感器，用于糖尿病血糖监测。通过定点突变在糖结合位点附近引入单个半胱...