细胞毒性T淋巴细胞（CTL）可通过穿孔素-颗粒酶B和Fas/FasL两条途径诱导靶细胞凋亡，但半胱天冬酶激活动力学长期难以实时监测。作者开发了一种基于圆形排列荧光素酶的新型生物传感器检测方法，将GloSensor（GLS）热稳定荧光素酶变体内部连接caspase 3/7切割位点DEVD或granzyme B/caspase 8切割位...
生物发光技术已广泛应用于生物传感器，其中天然发光细菌费氏弧菌（Vibrio fischeri）常用于水毒性分析。本研究评估了两种新克隆的甲虫荧光素酶用于大肠杆菌“光关闭”（light off）毒性生物传感器的适用性：Macrolampis 萤火虫荧光素酶和 Pyrearinus termitilluminans 叩头虫荧光素酶。结果...
中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）可引起重症肺炎且病死率超过50%，目前尚无有效抗病毒药物。为快速鉴定MERS-CoV复制抑制剂，作者表达MERS-CoV木瓜样蛋白酶（PLpro）和3C样蛋白酶（3CLpro），并建立基于荧光素酶的生物传感器以监测细胞内蛋白酶活性。结果显示，MERS-CoV PLpro可识别并切割生物传感器...
体内生物发光成像（BLI）正日益成为现代生物学研究的重要方法。该技术利用表达荧光素酶的生物报告细胞发出的光，对活体动物进行非侵入式检测，已广泛应用于基因功能、药物发现与开发、细胞迁移、蛋白-蛋白相互作用，以及肿瘤发生、癌症治疗与疾病进展等生物分子过程研究。本文综述了BLI与多种生物报告/生物传感系统的整合方式，讨论了不同荧光素酶报告...
重金属是环境中最严重的污染物之一，亟需灵敏、快速的生物监测方法。生物可利用性、毒性和遗传毒性等关键参数无法仅靠化学分析测定，而必须使用活细胞。全细胞生物传感器将整个细胞作为单一报告器，同时包含生物受体和信号换能元件。本文报道了两种基于热四膜虫（Tetrahymena thermophila）MTT1 和 MTT5 金属硫蛋白启动子与...
XylR 调控蛋白来自 Pseudomonas putida mt-2 的 TOL 质粒，参与甲苯和苯降解途径。本文描述基于 XylR 及其同源启动子 Pu 构建并实验室表征重组生物传感器（pGLPX 质粒）。在 pGLPX 质粒中，报告基因 luc 受 Pu 启动子控制。我们评估两种不同核苷酸序列作为 SD 元件改善生物报告灵敏度...
NahR 是萘降解途径中响应水杨酸的转录调控因子，是检测萘和水杨酸的微生物生物传感器核心元件。为最大化传感器灵敏度，作者通过定点突变 nahR 基因进行理性设计，在已知参与中心诱导剂识别和 C 端多聚化的第 169 位和第 248 位构建 8 个单突变体（N169A、N169C、N169K、N169S、R248H、R248M、R24...
北美萤火虫 Photinus pyralis 荧光素酶（Luc）发射黄绿光（557 nm），已广泛用于基因报告检测、全细胞生物传感器测量和活体成像。具有红移生物发光且比活性较高的荧光素酶变体可与绿色发光酶配对用于双颜色报告检测，也可单独用于活体成像。本研究以先前报道的红色发光热稳定突变体为模板，通过定点突变技术构建两种发射峰更红、同...
全细胞基因改造生物报告系统被设计为在响应目标分析物或相关分析物组时发出可检测信号；当与能够测量这些信号的换能器集成后，即形成生物传感器，可作为自包含分析系统，用于基础和应用环境、医学、药理学及农业科学。历史上，这类装置主要关注绿色荧光蛋白、水母荧光素、萤火虫荧光素酶和/或细菌荧光素酶等信号蛋白。本文综述了这些传感器系统的生物化学与遗...
亚致死代谢效应是重要的毒理学终点。本研究采用表达萤火虫荧光素酶的转基因秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）生物发光作为快速、定量的代谢终点，评估氧化应激剂和环境污染物镉（以氯化镉形式提供）在亚致死慢性暴露（19 h）下的效应。在0–30 μM Cd测试范围内，线虫生物发光呈浓度依赖性下降，其灵敏度与分别经67...
两类海绵（动物界多孔动物门）具有由骨针组成的硅质骨骼。此前对六放海绵大型骨针（>5 cm）的光纤-力学性能研究表明，它们是有效的光收集光纤。本文报道，海绵Suberites domuncula具有由有机发光酶荧光素酶（luciferase）和无机光传导二氧化硅骨针（silica spicules）组成的生物传感器系统。作者证明了该海...
本研究旨在构建一种可用于分析细胞代谢状态的双歧杆菌生物传感器。作者通过电穿孔将携带叩头虫（Pyrophorus plagiophthalamus）昆虫荧光素酶基因的人源肠道菌长双歧杆菌长亚种（Bifidobacterium longum biovar longum）进行转化，所用载体为pGBL8b，并研究了影响该生物发光表型产光的基...