丙酮酸进入线粒体依赖线粒体丙酮酸载体（MPC），MPC 是连接糖酵解与氧化磷酸化的碳代谢关键节点，其活性对细胞生物能学具有重要意义。此前方法只能间接、低时空分辨率地评估 MPC 活性。作者基于 MPC1 和 MPC2 的分子鉴定，构建了名为 RESPYR 的遗传编码生物传感器：将 MPC1 和 MPC2 分别 C 端融合荧光受体 V...
FFAR1/GPR40 是表达于胰腺β细胞的七次跨膜受体，可被游离脂肪酸激活，是增强2型糖尿病胰岛素分泌的潜在靶点。GPR40 已知主要通过 Gq/11 信号转导，但七次跨膜受体还可通过 β-arrestin 介导 G 蛋白非依赖性信号，不同配体可产生偏向性激动。本研究利用基于 BRET 的活细胞生物传感器实时监测 GPR40 信号...
G蛋白偶联受体（GPCR）可根据结合配体所稳定的构象选择性激活不同信号通路，即信号偏倚。已有研究在多种GPCR中报道了偏倚信号，包括趋化因子受体，但多数工作仅比较G蛋白依赖与β-arrestin依赖通路的整体偏倚，未解析特定G蛋白亚型之间的偏倚。本研究利用BRET生物传感器直接监测G蛋白激活，考察趋化因子受体CCR2、CCR5和CC...
肾性尿崩症（NDI）可由肾脏2型血管加压素受体（V2R）功能缺失突变引起。本研究鉴定一名NDI患者中已报道但未表征的V2R N321K错义突变。作者构建高灵敏度Epac型生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器，在激动剂刺激瞬时转染V2R的HEK293细胞后实时测量cAMP；并用BRET检测β-arrestin结合，用抗HA-Al...
细胞信号网络在环境刺激下被激活，其特异性取决于下游通路在时间和空间上的动态整合。为解析单一信号通路的动态调控，研究者开发了多种活细胞生物传感器。生物发光共振能量转移（BRET）技术因无需荧光激发、信噪比高，特别适合监测活细胞中的蛋白互作或构象变化。细胞外调节激酶（ERK）广泛表达并参与增殖、分化、神经可塑性、存活和凋亡等多种功能，其...
本研究利用生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器筛选人催产素受体（OTR）的功能选择性配体。结果显示，催产素（OT）可促进 OTR 与 Gq 及所有 Gi/o 亚型直接结合并激活；其他在关键结构/功能残基上发生取代的肽类类似物均表现出对 G 蛋白亚型的偏向性激活。除 OT 外，没有配体能激活 GoA 或 GoB；除一种例外，所有...
多巴胺受体与其他受体亚型的相互作用可能调节多巴胺相关功能与行为。痕量胺相关受体1（TAAR1）是一种Gs蛋白偶联受体，可被β-苯乙胺（β-PEA）和酪胺等痕量胺激活，并可能通过调节多巴胺能神经元放电或改变多巴胺D2受体（D2R）对配体的反应性影响多巴胺能系统。本研究利用cAMP生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器，发现D2R拮...