血管紧张素II 1型受体（AT1R）不仅作为G蛋白偶联受体，还可作为机械传感器，通过β-arrestin依赖途径传递信号。本研究利用β-arrestin2偏向激动剂作为构象探针，在药理学和生物物理实验中检验机械拉伸是否稳定AT1R特有的β-arrestin激活构象。在表达AT1R-β-arrestin2融合蛋白的细胞中，渗透压拉伸提...
酪氨酸激酶受体刺激启动信号级联并激活PI3K。激活的PI3K以PIP2为底物生成PIP3，后者通过Akt的PH结构域将Akt招募至质膜，使其被PDKs磷酸化激活；激活的Akt调控细胞代谢、增殖与存活，因此PI3K通路是药物发现的重要靶点。然而，现有PIP3检测方法技术难度高且不适合高通量筛选。作者建立了一种源自MCF-7乳腺癌细胞的...
肾性尿崩症（NDI）可由肾脏2型血管加压素受体（V2R）功能缺失突变引起。本研究鉴定一名NDI患者中已报道但未表征的V2R N321K错义突变。作者构建高灵敏度Epac型生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器，在激动剂刺激瞬时转染V2R的HEK293细胞后实时测量cAMP；并用BRET检测β-arrestin结合，用抗HA-Al...
细胞信号网络在环境刺激下被激活，其特异性取决于下游通路在时间和空间上的动态整合。为解析单一信号通路的动态调控，研究者开发了多种活细胞生物传感器。生物发光共振能量转移（BRET）技术因无需荧光激发、信噪比高，特别适合监测活细胞中的蛋白互作或构象变化。细胞外调节激酶（ERK）广泛表达并参与增殖、分化、神经可塑性、存活和凋亡等多种功能，其...
生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器在过去十年中已被广泛用于在活细胞中研究蛋白-蛋白相互作用和细胞内信号转导。本综述讨论为研究 G 蛋白偶联受体（GPCR）生物学、药理学和信号转导而开发的多种 BRET 生物传感器。GPCR 可形成包含 G 蛋白或 β-arrestin 的两类多蛋白信号复合物，具有功能选择性的药物可分别影响 ...
本研究利用生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器筛选人催产素受体（OTR）的功能选择性配体。结果显示，催产素（OT）可促进 OTR 与 Gq 及所有 Gi/o 亚型直接结合并激活；其他在关键结构/功能残基上发生取代的肽类类似物均表现出对 G 蛋白亚型的偏向性激活。除 OT 外，没有配体能激活 GoA 或 GoB；除一种例外，所有...
多巴胺受体与其他受体亚型的相互作用可能调节多巴胺相关功能与行为。痕量胺相关受体1（TAAR1）是一种Gs蛋白偶联受体，可被β-苯乙胺（β-PEA）和酪胺等痕量胺激活，并可能通过调节多巴胺能神经元放电或改变多巴胺D2受体（D2R）对配体的反应性影响多巴胺能系统。本研究利用cAMP生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器，发现D2R拮...
生物发光共振能量转移（BRET）系统长期以蓝绿色 Renilla 荧光素酶（Rluc）为供体，但其底物苯基海鞘素昂贵且生化性质不利，限制应用。本文报道一系列基于利用 D-荧光素（D-luciferin）的荧光素酶的新型 BRET 供体-受体对，具有红移光子输出、更优生化性质和更高效率。作者建立改进的 Förster 方程预测最佳 B...