Methods (San Diego, Calif.)
2012
Gonzalez LC
约四分之一的人类基因编码在胞外空间发挥功能或连接胞外与胞内环境的蛋白。这些分泌组蛋白之间的物理相互作用调控多种生物活动,是重要治疗靶点;部分胞外蛋白也被病原体利用以进入宿主或逃避免疫。尽管胞外蛋白-蛋白相互作用(ePPI)重要,相关知识仍有限。弱亲和力和低丰度常使传统生化纯化、cDNA文库表达克隆等方法难以鉴定这些相互作用;现有大规...
Food additives & contaminants. Part A, Chemistry, analysis, control, exposure & risk assessment
2012
Maragos CM
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是由某些镰刀菌产生、可污染小麦、大麦和玉米的真菌毒素,影响动物健康与食品安全。为快速监测小麦中 DON,作者基于生物层干涉(BLI)原理开发了一种免疫传感器。通过采用一抗—胶体金偶联物(Ab-Au)对信号进行放大,传感器响应显著增强;且放大效应在小麦基质中明显高于缓冲液,提示基质成分可能参与增强。增强后的...
Journal of computer-aided molecular design
2011
Wartchow CA, Podlaski F, Li S, Rowan K 等 7 人
基于生物传感器的小分子片段筛选是药物发现中的有价值工具。与许多生化方法相比,该方法可通过检查结合谱和响应,将主要命中与非特异性或非理想相互作用区分开,从而降低假阳性率。生物层干涉(BLI)通过测量可见光从光学层和含感兴趣蛋白的生物层反射所产生的干涉图案变化来监测小分子相互作用,是一种较新的方法。BLI 采用浸入 96 孔或 384 ...
Cells, tissues, organs
2011
Groppe JC, Wu J, Shore EM, Kaplan FS
经典进行性骨化异常(FOP)中,骨形态发生蛋白I型受体激酶ALK2/ACVR1调控亚域的单一复发突变R206H导致异位骨化。该突变仅将一个精氨酸替换为组氨酸,而组氨酸在生理pH范围内可发生质子化,因此提出pH敏感开关机制,导致突变受体在配体非依赖条件下激活BMP信号。为检验该机制中FKBP12介导的激酶自抑制是否丧失,作者用纯化的野...
Clinical and vaccine immunology : CVI
2010
Carney PJ, Lipatov AS, Monto AS, Donis RO 等 5 人
在2009年大流行H1N1流感暴发初期,血凝抑制(HI)和微量中和(MN)检测提供了人群交叉反应保护信息,但难以自动化、高通量且实验室间标准化困难。为此,本文报道一种无细胞、无标记的流感抗体生物传感器检测法(f-AbBA),用于流感研究和诊断。该方法利用重组血凝素(HA)与无标记生物层干涉(BLI)技术,实时测量HA与特异性抗HA抗...
Analytical biochemistry
2009
Abdiche YN, Malashock DS, Pinkerton A, Pons J
本文展示了无标记实时光学生物传感器在竞争性结合实验中的应用,通过对抗体面板进行表位分箱。作者描述了三种实验取向,即串联阻断、预混阻断和经典夹心阻断,并分别在ForteBio Octet QK、Bio-Rad ProteOn XPR36和GE Healthcare Biacore 3000三个平台上完成。通过成对检测抗体是否相互阻断对...
Analytical biochemistry
2008
Abdiche Y, Malashock D, Pinkerton A, Pons J
本文评估了ForteBio Octet光学生物传感器在蛋白相互作用动力学与亲和力测定中的应用。Octet基于生物层干涉(BLI),使用一次性光纤传感器尖端,从开放振荡微孔板中直接取样,无需微流控。作者以抗CGRP单克隆抗体4901及其Fab片段为模型,比较Octet与Biacore 3000和ProteOn XPR36两种表面等离子...