腹泻性贝类毒素（DSTs）是广泛分布的海洋毒素，对人类健康构成重大威胁，其中甲藻毒素-1（DTX-1）毒性最强。现有检测方法存在伦理问题和技术缺陷，亟需更合适的替代监测手段。本研究首次通过体外筛选获得可高亲和、高特异性结合 DTX-1 的 DNA 适配体。经序列优化，得到核心序列适配体 N59a，其解离常数 KD 为 64 nM，并...
共价抑制剂和化学蛋白质组学探针的兴起，要求建立稳健的生物物理与分析方法，以表征其与靶标生物分子的复杂相互作用，并准确区分非共价结合与共价加合物形成。共价免疫招募分子（CIR）通过提高免疫细胞与肿瘤细胞接近度促进免疫识别。本文描述了生物层干涉（BLI）生物传感器、流式细胞术和溶液荧光检测方法，用于表征CIR与抗体的结合及CIR-抗体共...
过去数十年，疾病诊断、药物研发与环境健康安全对生物传感器技术的需求快速增长。光学谐振器生物传感器凭借强光限制与共振特性，可实现生物分析物的高灵敏、快速、无标记检测；微流控与微纳加工进步又使其能够小型化，并在小体积样品中同时检测多种分析物。因此，该类传感器不仅适用于常规医学诊断，也被视为有前景的即时检测平台。本综述系统回顾近五年无标记...
G蛋白偶联受体（GPCR）是重要的膜受体家族，细胞实验是评估其相互作用的主要手段，但设计和内禀复杂性限制了应用。基于生物传感器的方法可直接、特异性地报告 GPCR 与 arrestin 或 G 蛋白的结合，可作为替代方案。本文提出一种将不同 arrestin-3 蛋白（野生型及突变体 X：I386A、突变体 Y：R393E）通过组氨...
传统分析生物传感器相互作用数据的方法基于简化假设，即较大生物分子相互作用也是均一的。近期报道人源血管紧张素转换酶2（ACE2）在SARS-CoV-2进入人体靶细胞中起关键作用，并采用基于表面等离子共振（SPR）和生物层干涉（BLI）的生物传感器技术开展结合研究。已发表亲和力常数由传统方法获得，将ACE2与SARS-CoV-2受体结合...
人类免疫缺陷病毒（HIV）包膜糖蛋白（Env）是开发保护性疫苗的主要靶标。Env 上广泛的 N-连接糖基化可能影响其效力、稳定性和表达产量，表达宿主会影响糖基化程度和类型。本研究报道了候选 C 亚型免疫原 CO6980v0c22 gp145（目前处于 I 期临床试验）在 CHO-K1 和 Expi293F 两种宿主细胞中生产的糖基化...
神经退行性疾病目前仍缺乏鉴别诊断和治愈手段。Tau蛋白是常见tau病（tauopathies）的生物标志物，参与微管与细胞结构稳定；但翻译后修饰可使其自组装为细胞毒性结构，并在细胞内外共定位，因此可作为蛋白病理与神经退行性疾病的可行生物标志物。本文报道一种用于tau441蛋白的新型光学生物传感器，基于适配体识别探针和生物层干涉（BL...
化合物与烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）的结合在生物医学研究中备受关注，但现有方法通量低、样品消耗大或受分类学限制。本文报道一种新型无标记生物层干涉（BLI）检测方法，结合经改造的模拟肽（mimotope），用于测量不同物种nAChR α亚基正构位点的配体结合。作者以广食性蛇（Acanthophis antarcticus）、鱼类专...
分枝杆菌感染引起的肺病仍是全球公共卫生问题。结核分枝杆菌复合群（MTBC）与非结核分枝杆菌（NTM）所致肺部疾病临床表现高度相似，快速区分二者对合理治疗至关重要。本研究旨在建立基于抗体的生物传感器系统，用于识别 MTBC 和 NTM 感染。作者制备并表征了特异性识别分枝杆菌 Ag85B 蛋白的单克隆抗体（mAb）。其中，抗 Ag85...
糖基化是受生物工艺参数和细胞生理状态影响的单克隆抗体重要质量属性。本研究开发了基于凝集素的生物层干涉（LBLI）方法，用于相对评估Fc糖基化免疫球蛋白G（IgG）的半乳糖基化和岩藻糖基化水平。在15 L生物反应器中改变工艺条件重组表达Fc糖基化IgG并收获产物，验证了LBLI对不同样品的可靠性、稳健性和适用性，并以液相色谱-质谱（L...
为并行分析数百至数千个分子相互作用，高通量生物传感系统被广泛发展。本研究采用成熟的凝血酶DNA适配体检测体系，比较三种无标记高通量成像系统（自研iRIf、bscreen SCORE和IBIS-MX96 SPRi）以及分析软件和操作人员的影响，并以Octet-RED96 BLI、Biacore3000 SPR和Monolith-NT....
利什曼病是由利什曼原虫引起的被忽视热带病，现有治疗药物有限且无疫苗。UDP-葡萄糖（UDP-Glc）和 UDP-半乳糖（UDP-Gal）的生物合成对原虫存活至关重要，受 UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（UGP）和 UDP-糖焦磷酸化酶（USP）控制。本研究以 L. major USP 为靶标，采用生物层干涉（BLI）技术筛选 965 个小...
体内蛋白常以大型大分子复合物形式存在，其结合特异性与动态变化决定功能输出。本研究在生物层干涉（BLI）生物传感器表面组装并转化炭疽毒素前内体复合物。首先，将半胱氨酸突变的致死因子 N 端（LFN）通过二硫键以最佳取向偶联至 BLI 传感器，使保护性抗原前孔（PAprepore）结合，Kd 约 1 nM。取向优化的 LFN-PApre...
淡水水体中节球藻素R（NOD-R）污染是重要的环境与公共健康问题。现有小鼠生物试验、HPLC、LC-MS、毛细管电泳及ELISA等方法存在伦理争议、耗时、昂贵或交叉反应等不足。本文以SELEX筛选的DNA适配体为特异性识别元件，构建了无标记生物层干涉（BLI）适配体传感器用于NOD-R检测。该传感器检测范围为40–600 nM，线性...
单克隆抗体（mAb）表位的表征对治疗性抗体、诊断工具和疫苗开发具有重要意义，也可为病原体感染或疫苗接种后抗体应答的序列库分析提供功能信息。然而，表位映射策略的发展滞后于 mAb 的发现。作者开发了一种定点突变方法，并与生物层干涉（BLI）生物传感器联用，用于映射 mAb 表位。通过构建流感 A 病毒重组血凝素（HA）和神经氨酸酶（N...
可溶性CD147（sCD147）是膜结合CD147的脱落形式，参与细胞功能调节，其在体液中的存在与多种疾病相关。本研究旨在建立抗体生物传感器，用于同时差异检测sCD147的一般型和截短型。作者将生物层干涉技术（BLItz）与特异性识别CD147不同胞外域的单克隆抗体（mAb）相结合，建立了基于抗体的生物传感器，以快速测量并表征sCD...
本研究评估了一种基于生物素化GroEL-链霉亲和素生物层干涉（GroEL-BLI）的自动化方法，用于检测多种药理学相关单克隆抗体（mAb）溶液中瞬时形成的前聚集体。利用该方法对IgG1和IgG4 mAb的聚集倾向进行排序，并对最不稳定IgG4 mAb施加高温、酸性pH及盐酸胍等应力。结果显示，GroEL-BLI主要在尺寸排阻色谱（S...
生物层干涉（BLI）是一种实时、无标记的光学传感技术，已显著推动疫苗研究与开发。BLI Octet 平台相比传统标记方法具有高通量、操作简便、可靠性和高精度等优势。多种策略可将病原体或宿主分子固定在 BLI 生物传感器表面，用于实时动力学与亲和力分析、定量检测和高通量滴度测定。这些策略可应用于表位设计、抗体筛选、病原体多样性分析、宿...
Octet 生物层干涉（BLI）生物传感器为表征抗体-抗原相互作用提供了高通量替代方案，可补充表面等离子共振（SPR）和 SPR 成像（SPRi）平台。然而，Octet 在准确、可重复测定单克隆抗体（mAb）结合速率常数时，常受分析物再结合和传质限制（MTL）影响。本研究针对上述问题，系统优化了 Octet HTX 上 mAb-抗原...
本文综述光学生物传感器在小分子药物筛选中的应用与展望。作者指出，表面等离子共振（SPR）、光学波导光栅（OWG）和生物层干涉（BLI）等无标记光学平台已成为药物发现中重要的生物物理工具，可实时监测化合物与靶蛋白或完整细胞的相互作用，提供结合动力学、热力学及细胞功能响应信息。文章提出成功应用取决于“正确通量、正确灵敏度、正确试剂”，并...