Development, growth & differentiation
2013
Aoki K, Kamioka Y, Matsuda M
荧光蛋白成像技术的进步揭示了发育生物学中的多种生物过程。特别是基于荧光共振能量转移(FRET)原理的遗传编码生物传感器,已被用于在活细胞中可视化胞内信号分子的空间与时间动态。然而,高灵敏度FRET生物传感器的开发及其在发育生物学中的应用仍具挑战,限制了其广泛使用。本综述首先概述FRET生物传感器成像的一般流程与实验技巧,随后介绍FR...
Biosensors & bioelectronics
2013
Sun J, Guo L, Xu H, Tang J 等 5 人
本文报道了一种以变性牛血清白蛋白(dBSA)为支架连接多条寡核苷酸(ODNs)的新策略。所得 dBSA-ODNs 共价杂化体能够通过与 CdTe 量子点(QDs)表面未占据配位金属位点发生配位作用,自组装到 QDs 表面,形成 QDs/dBSA-ODNs 生物偶联物。该偶联物在水溶液中具有长期稳定性,并保持其荧光量子产率和光谱性质。...
Analytical chemistry
2013
Wang Y, Wu Z, Liu Z
本文报道了一种以聚间苯二胺(PMPD)纳米球作为无标记能量受体的上转换荧光共振能量转移(UC-FRET)生物传感器。5′端带巯基的单链DNA(ssDNA)探针通过Sulfo-SMCC共价连接到聚乙烯亚胺(PEI)功能化的Yb,Er共掺杂NaYF4上转换磷光体(UCPs,能量供体)表面。由于PMPD具有富π电子共轭结构,ssDNA与P...
The Analyst
2013
Lu X, Dong X, Zhang K, Han X 等 6 人
本研究设计了一种包含金纳米棒(AuNRs)和荧光素(FAM)的荧光共振能量转移(FRET)体系,用于检测乙型肝炎病毒(HBV) DNA序列。采用种子介导表面活性剂导向法合成AuNRs,其表面包覆一层十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),使AuNRs带正电。将FAM标记的单链DNA(FAM-ssDNA)加入AuNRs悬浮液后,探针DNA吸...
Journal of fluorescence
2013
Babu E, Mareeswaran PM, Rajagopal S
本文报道了一种用于检测人α-凝血酶的高灵敏、高选择性光学传感器体系。制备了表面功能化的发光[Ru(dpsphen)3]4−(dpsphen为4,7-二苯基-1,10-菲啰啉二磺酸盐)掺杂二氧化硅纳米颗粒(SiNPs),粒径约70 nm。以双(磺基琥珀酰亚胺)己酸酯(BS3)为交联剂,将DABCYL(2-(4-二甲氨基苯基)重氮基苯甲...
PloS one
2012
Kominami K, Nagai T, Sawasaki T, Tsujimura Y 等 16 人
背景:半胱天冬酶(caspase)激活是凋亡执行的关键步骤,但起始半胱天冬酶-8(CASP8)激活的动态过程尚未完全阐明。方法/主要发现:作者建立了一种基于荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器,用于在单细胞水平可视化与 CASP8 激活相关的凋亡信号。该双 FRET(dual-FRET)系统由三荧光蛋白融合蛋白 CYR83 组成...
Applied microbiology and biotechnology
2012
荧光共振能量转移(Förster resonance energy transfer, FRET)是指供体荧光团受激后,通过非辐射方式将能量转移给受体荧光团的过程。FRET 技术可用于生物物理与分子生物学中的分子动力学定量分析,例如监测蛋白-蛋白相互作用、蛋白-DNA相互作用以及蛋白构象变化。基于 FRET 的生物传感器不仅能在异质...
Talanta
2012
Ai X, Niu L, Li Y, Yang F 等 5 人
本文报道了一种用于金刚烷胺(Amantadine, AD)测定的新型光学生物传感器。该传感器基于水溶性β-环糊精(β-CD)功能化镉碲量子点(CdTe QDs)与罗丹明B(RB)之间的荧光共振能量转移(FRET)。RB可通过疏水作用进入β-CD空腔,使CdTe QDs作为供体、RB作为受体发生FRET,导致QDs荧光被淬灭。加入AD...
Journal of biomedical optics
2012
Su T, Li X, Liu N, Pan S 等 7 人
可逆氧化是蛋白酪氨酸磷酸化调控的重要机制。生长因子刺激后产生的过氧化氢(H2O2)被认为可抑制蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性,从而使蛋白酪氨酸激酶(PTK)提高蛋白酪氨酸磷酸化稳态水平,推动信号传播。然而,H2O2对酪氨酸磷酸化信号动力学的影响,尤其在活细胞中,仍不清楚。本研究采用基于荧光共振能量转移(FRET)的基因编码Src激酶...
Talanta
2012
Lad AN, Agrawal YK
本研究利用DNA标记金纳米颗粒(AuNPs)构建光学纳米生物传感器,用于体外监测卡铂(carboplatin)与DNA的相互作用。卡铂是一种细胞毒性药物,在有效剂量下可产生肾毒性。该传感器基于荧光共振能量转移(FRET)原理:DNA标记AuNPs暴露于卡铂后,卡铂与DNA结合并引起复合物构象变化,使荧光分子或荧光/猝灭分子间距离减小...
Biosensors & bioelectronics
2012
Shi Y, Wu J, Sun Y, Zhang Y 等 8 人
水安全是全球普遍问题。微囊藻毒素(MCs)是蓝藻产生的肝毒素,对饮用水安全构成严重威胁。世界卫生组织规定饮用水中微囊藻毒素-LR(MC-LR)限值低至1 mg/L,因此需要灵敏的痕量检测方法。本文基于金纳米颗粒(Au NPs)诱导氧化石墨烯(GO)荧光猝灭现象,建立了一种用于微囊藻毒素检测的可靠生物传感器。MCs可通过与修饰在Au ...
PloS one
2012
Matthews DR, Fruhwirth GO, Weitsman G, Carlin LM 等 11 人
功能成像可提供传统高内涵筛选难以达到的定量水平,因为现有高内涵系统多将单细胞表型分析放大,指标偏图像化且较主观。本文开发并验证了一种结合稳态荧光各向异性成像与荧光寿命成像(FLIM)的原型高内涵筛选平台,用于蛋白质-蛋白质相互作用检测中的小分子库客观定量筛选。作者介绍了仪器开发,并说明如何从宽场受体荧光各向异性成像中提取荧光共振能量...
Journal of diabetes
2012
Hasslacher C, Auffarth G, Platten I, Rabsilber T 等 9 人
背景:EyeSense开发了一种植入结膜下的新型生物传感器,可非侵入性测量周围组织葡萄糖浓度。本研究评估EyeSense植入物与指尖血糖测定值的相关性,以及16周耐受性与安全性。方法:28名糖尿病患者,在局麻和无菌条件下植入。通过标准化高碳水饮食和/或胰岛素注射使血糖在60–300 mg/dL间升降,比较实验室法毛细血管血糖与生物传...
Analytical chemistry
2012
Wang Y, Shen P, Li C, Wang Y 等 5 人
基质金属蛋白酶-2(MMP-2)是血液中重要的疾病相关生物标志物,但由于血液基质复杂,直接、灵敏、选择性测定仍具挑战。本文报道了一种基于上转换荧光粉(UCPs)向碳纳米颗粒(CNPs)的荧光共振能量转移(FRET)的同相生物传感器,用于超灵敏检测MMP-2。作者设计了同时包含MMP-2特异性底物域(PLGVR)和富π基序(HHYY)...
Cancer science
2012
Aoki K, Komatsu N, Hirata E, Kamioka Y 等 5 人
肿瘤信号转导通路的组成分子是抗癌药物的重要靶点。尽管已有大量关于这些分子性质的知识,但信号分子在活细胞中的时空调控仍不清楚。基于荧光共振能量转移(FRET)原理的生物传感器已被开发用于在活细胞中可视化信号分子活性。然而,高灵敏度FRET生物传感器开发困难,限制了其在癌症研究中的广泛应用;缺乏稳定表达FRET生物传感器的细胞系也制约了...
Plant biotechnology journal
2012
Adams JP, Adeli A, Hsu CY, Harkess RL 等 8 人
重金属在环境中积累对动植物构成风险,但监测潜在累积点存在规模与经济挑战。本研究提出并测试了一种基于植物荧光共振能量转移(FRET)变化响应锌(Zn)积累的方法,以植物体内锌水平作为环境健康代理。作者将植物锌转运蛋白两端融合荧光蛋白,构建 ProPtZNT1-DsRed-PtZNT1-ECFP(PRZC)嵌合蛋白,并转入拟南芥和杨树两...
Sensors (Basel, Switzerland)
2011
Algar WR, Krull UJ
本文报道了利用固定化量子点(QD)作为供体的固相荧光共振能量转移(FRET)核酸杂交检测体系,并围绕界面化学优化其灵敏度、检出限与再生复用性能。在该体系中,与杂交事件相关的受体染料在固定化QD供体附近产生FRET敏化发射,作为分析信号。通过减小有效传感面积,可降低QD供体光致发光背景,使更微量的受体发射可被分辨,从而降低检出限;在每...
Sensors (Basel, Switzerland)
2011
Vannoy CH, Tavares AJ, Noor MO, Uddayasankar U 等 5 人
半导体量子点(QD)因其高量子产率、宽吸收、窄对称可调发射、长荧光寿命和优异抗光漂白等光学特性,已成为多种生物传感与生物探针技术中的信号发生平台。QD 在荧光共振能量转移(FRET)中可作为供体,并适合光学多重检测。然而,多数 QD 生物探针和传感技术依赖体相溶液环境,表面选择性结合常需较长时间达到稳态信号。微流控系统(MFS)可将...
Nature protocols
2011
Kardash E, Bandemer J, Raz E
基于荧光共振能量转移(FRET)的分子生物传感器是研究活细胞中蛋白活性的重要工具,但因其固有的细胞复杂性和三维成像挑战,很少用于完整生物体。本文提供在早期发育中使用单链分子内 FRET 生物传感器的实验方案,给出胚胎 FRET 比值成像的通用流程,包括数据采集条件和比值图像生成算法。作者以 pRaichu RacFRET 生物传感器...
Analytical chemistry
2011
Wang Y, Bao L, Liu Z, Pang DW
本文报道了一种基于上转换磷光体(UCPs)向碳纳米颗粒(CNPs)荧光共振能量转移(FRET)的凝血酶适配体生物传感器。聚丙烯酸(PAA)功能化的 NaYF4:Yb,Er UCPs 通过 EDC/Sulfo-NHS 共价标记 5'-NH2-GGTTGGTGTGGTTGG-3' 凝血酶适配体,适配体再经 π-π 堆积吸附到 SDBS ...