本研究开发了一种基于细胞基底形变的机械刺激装置和一种更灵敏的细胞黏附测量方法。精确定位于细胞附近的探针可实现垂直局部机械刺激，频率约207 Hz，应变幅度约50%。该装置用于检测人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的钙信号响应。细胞内钙离子浓度通过基因编码的Cameleon生物传感器测量，同时抑制瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员7（T...
蛋白酶激活受体-2（PAR-2）可作为蛋白酶的天然生物传感器，并调控皮肤多种功能，但其在皮脂细胞中的表达与作用尚不清楚。本研究在 SZ95 人源皮脂细胞中于 mRNA 和蛋白水平鉴定了 PAR-2 表达。PAR-2 激动肽或痤疮丙酸杆菌（P. acnes）培养上清可诱导细胞内 Ca2+ 动员，表明 P. acnes 是皮脂细胞 PA...
发育心肌细胞的核心特性是能够自发跳动，但其机制是否类似成人心脏尚未直接验证。本研究在人诱导多能干细胞来源心肌细胞（hiPS-CM）和大鼠新生心肌细胞（rN-CM）中，通过全细胞/穿孔膜片钳和二维共聚焦成像，比较肌浆网与线粒体钙信号及If通道对自发节律的贡献。结果显示：两类细胞在24℃下均自发跳动（60–140次/分）；将膜电位钳制在...
该方案描述利用水母 Aequorea victoria 的 aequorin 蛋白在活酵母细胞中监测胞内 Ca2+ 水平。待测酵母菌株需表达 A. victoria 的 apoaequorin 钙生物传感器，再与辅因子 coelenterazine 结合重构为有活性的 aequorin；酵母自身不能合成 coelenterazine...
瞬时受体电位经典6（TRPC6）是一种阳离子选择性、二酰甘油（DAG）调节、钙离子通透通道，可由Gq蛋白偶联受体激动剂激活。TRPC6功能障碍与血管痉挛、肾小球硬化等心血管和肾脏疾病相关。当组胺H1受体（H1R）被激动剂刺激时，尽管激动剂持续存在，TRPC6活性仍衰减至基线。本研究利用HEK细胞表达系统和可同时检测胞内DAG与Ca2...
肌醇1,4,5-三磷酸（InsP3）信号在心肌细胞中的作用尚未完全阐明，但被认为与触发活动倾向增加有关。本研究旨在确定 InsP3 受体如何将 Ca2+ 释放转化为质膜去极化并导致心律失常样活动。作者采用胚胎干细胞来源心肌细胞（ESdCs）作为模型，因其自发电活动依赖 InsP3 介导的 Ca2+ 释放。利用 FRET 型 InsP...
本研究旨在确定麻醉小鼠骨骼肌小动脉基础血管张力的分子要求，并判断非同步钙波是否参与。作者将表达 exMLCK 或 smGCaMP2 遗传编码钙生物传感器的小鼠 cremaster 肌肉外翻，利用宽场、共聚焦和多光子显微镜观察平滑肌细胞钙信号与小动脉直径。结果显示，基础状态下小动脉张力约为 50%；局部阻断 Ang-II AT1 受体...
AKAP79/150 是突触后密度中的支架蛋白，通过锚定蛋白激酶 A（PKA）、蛋白激酶 C（PKC）及磷酸酶 PP2B/钙调磷酸酶和 PP1，协调受体磷酸化与去磷酸化，调控兴奋性突触可塑性。本研究利用 pull-down 实验和表面等离子共振（SPR）生物传感器分析 AKAP79 与两种钙结合蛋白 caldendrin 和 cal...
钙是通用信使，可将多种环境刺激和发育信号转化为特定细胞与发育反应。真菌虽普遍依赖 Ca2+ 信号调控生长、发育和致病，但缺乏可在单细胞水平成像亚细胞 Ca2+ 时空动态（即 Ca2+ 特征）的稳健方法，限制了相关研究。本文报道首次在真菌中成功表达基于 FRET 的 Ca2+ 生物传感器 Cameleon YC3.60。对表达该传感器...
本研究设计了一种新装置，可在柔性弹性凝胶上产生局部机械振动，从而在亚细胞位置对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）进行机械刺激。采用基于荧光共振能量转移（FRET）的钙生物传感器（改良型 Cameleon，以 ECFP 和 YPet 为供体/受体）监测机械刺激下细胞内钙浓度的时空分布。结果显示，多数细胞在机械刺激后出现覆盖整个细胞体的胞内...
微生物相关分子模式（MAMP）与模式识别受体（PRR）结合并激活受体激酶是植物先天免疫的关键步骤。MAMP 感知后最早可检测事件之一是胞质 Ca2+ 水平快速短暂升高。植物中导致 Ca2+ 内流的信号事件及所涉通道分子身份知之甚少。本研究使用稳定表达荧光素酶 aequorin Ca2+ 生物传感器的转基因拟南芥，监测细菌肽 MAMP...
磷脂酰肌醇4,5-二磷酸（PIP2）调节上颈神经节（SCG）交感神经元中的N型Ca2+电流（ICa）和M型K+电流。M1毒蕈碱和AT1血管紧张素受体不引起胞内Ca2+升高，并通过耗竭PIP2抑制两种电流；而B2缓激肽和P2Y嘌呤受体引起强IP3介导的[Ca2+]i升高，不耗竭PIP2也不抑制ICa。作者提出这种受体特异性源于差异化的...
本研究在HSY-EA1细胞中考察肌醇(1,4,5)-三磷酸[Ins(1,4,5)P3]生成对机械刺激诱导Ca2+响应的贡献。利用Ins(1,4,5)P3生物传感器LIBRAvIII，机械刺激引起受刺激区域胞浆[IP3]i局部升高，并随刺激区[IP3]i升高而像胞内IP3波一样扩展；随后邻近细胞出现短暂小幅[IP3]i升高。磷脂酶C抑...
本研究评估了可激活 Epac1 和 Epac2 的 cAMP 类似物乙酸甲酯 8-pCPT-2′-O-Me-cAMP-AM 在人朗格汉斯胰岛中的胰岛素促泌作用。RT-QPCR 显示人胰岛主要表达 Epac2，同时可检测到 Epac1。在胰岛灌流条件下，10 μM 8-pCPT-2′-O-Me-cAMP-AM 可增强 10 mM 葡萄...
胞外ATP调控多种信号系统，包括细胞间Ca2+信号（ICS）传播。Connexin半通道、P2x7受体（P2x7R）、pannexin通道、阴离子通道、囊泡和转运体均被认为是ATP释放的可能途径，但其在ICS中的作用存在争议。本研究在小鼠柯蒂器类器官培养中检测ICS，其中ATP作为IP3生成激动剂，引发与噪声性听力损失及毛细胞-传入...
在平滑肌细胞中，激动剂激活的肌浆网（SR）钙释放通过不同但相互重叠的转导通路发生。为全面研究 SR 钙通道如何被激活，需要分离同时激活的不同钙信号。此前作者在大鼠十二指肠肌细胞中表征，乙酰胆碱（ACh）通过结合 M2 毒蕈碱受体并激活兰尼碱受体亚型 2 诱导钙振荡。本文显示，ACh 同时引起依赖肌醇 1,4,5-三磷酸（InsP3）...