本研究利用ATP依赖性酶促反应（ATP-DER）、滚环扩增（RCA）的强信号放大能力以及羟胺放大的金纳米颗粒（Au NPs），构建了一种高灵敏、高选择性检测三磷酸腺苷（ATP）的化学发光（CL）生物传感器。该策略基于ATP作为T4 DNA连接酶的辅因子，可触发连接–RCA反应。在ATP存在时，T4 DNA连接酶催化锁式探针两端连接，...
II组和III组代谢型谷氨酸受体（mGluR）是G蛋白偶联受体（GPCR），通过激活Gai/o抑制腺苷酸环化酶。本研究旨在建立一种通用方法，克服在稳定转染体系中一致测量II组和III组mGluR激活的困难。作者在稳定转染GloSensor cAMP生物传感器的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中优化条件，实现简单且高重现（<5% S.E.M...
本文报道了一种基于垂直排列氧化锌纳米棒薄膜（ZnONR）的可重复使用化学发光胆碱纳米生物传感器。作者采用混合湿化学法在玻璃基底上制备ZnONR，并以16-磷酸十六烷酸（16-PHA）自组装单分子层为交联剂，通过EDC/NHS活化将胆碱氧化酶（COD）和辣根过氧化物酶（HRP）共价固定于ZnONR表面。胆碱在COD催化下被氧化生成过氧...
通过水解三乙氧基乙烯基硅烷（TEVS）和3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES），合成负载疏水性光敏剂四-α-(2,4-二叔丁基苯氧基)酞菁锌（ZnPc(OAr)4）的二氧化硅介孔纳米颗粒。所得纳米颗粒为约100 nm的单分散球形，在701 nm处呈现ZnPc(OAr)4的强Q带吸收，包埋后其水溶性显著提高。该纳米颗粒在有机和水溶液中经...
本文报道了一种基于氧化石墨烯（GO）纳米平台的无标记化学发光（CL）适配体传感器，用于快速、简便地检测三磷酸腺苷（ATP，作为模型分析物）。该策略利用 GO 对单链 DNA（ssDNA）的优先吸附作用，使其相对于刚性双链 DNA（dsDNA）或适配体-靶标复合物更易结合；同时利用苯乙醛（PGO）这一特殊化学发光试剂与吸附在 GO 表...
中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）可引起重症肺炎且病死率超过50%，目前尚无有效抗病毒药物。为快速鉴定MERS-CoV复制抑制剂，作者表达MERS-CoV木瓜样蛋白酶（PLpro）和3C样蛋白酶（3CLpro），并建立基于荧光素酶的生物传感器以监测细胞内蛋白酶活性。结果显示，MERS-CoV PLpro可识别并切割生物传感器...
本文提出一种新型化学发光（CL）生物传感器，用于灵敏检测野生型 p53 蛋白。先将高特异性共识双链寡核苷酸（ds-ODN）预固定于金板表面，用于捕获溶液中的野生型 p53 蛋白；随后用 N-生物素酰-N′-(6-马来酰己酰)肼（biotin-Mi）修饰野生型 p53 分子外表面的半胱氨酸残基，以便结合链霉亲和素-辣根过氧化物酶（SA...
生物发光反应以萤光素、Mg2+-ATP 和分子氧为底物，在萤光素酶催化下生成电子激发态氧化萤光素并释放可见光。萤光素酶最具前景的应用之一是生物传感器。为开发基于半胱天冬酶3/7（caspase 3/7）的凋亡生物传感器，作者通过重叠延伸 PCR 构建了 3 种 Photinus pyralis 萤光素酶的环状置换变体 CP-1、CP...
测量活细胞或生物体内的蛋白酶活性仍具挑战性。本文报道一种转基因编码生物传感器，可高灵敏、高特异报告炎症小体激活过程中 caspase-1 及其他蛋白酶的蛋白水解活性。该蛋白酶报告系统基于前体白介素-1β（pro-IL-1β）与 Gaussia 荧光素酶（GLuc）融合蛋白 iGLuc 的生物学特性：pro-IL-1β 依赖性的蛋白聚...
本研究开发了一种基于适配体的化学发光（CL）方法，用于高选择性和高灵敏度检测血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）。兔抗人PDGF-BB多克隆抗体通过共价偶联固定在具有反应性N-羟基琥珀酰亚胺酯（NOS）基团的96孔板表面。当存在目标蛋白时，生物素化适配体被捕获，形成抗体/PDGF-BB/生物素化适配体三明治复合物；随后链霉亲和素...
本研究开发了一种由 F0F1-ATPase 转子调控的新型免疫旋转生物传感器，用于快速检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）。该传感器以紫膜体中的 F0F1-ATPase 为分子马达换能器，通过 e 亚基单克隆抗体—生物素—中性亲和素—生物素连接子，将 DON 单克隆抗体连接至 F0F1-ATPase 的 e 亚基上，从而捕获 DON 残...
本文报道了一种高灵敏化学发光（CL）方法，用于检测植物激素吲哚-3-乙酸（IAA）。该方法以G-rich DNA标记的金纳米颗粒（AuNPs）作为化学发光探针，并结合DNA信号放大技术。IAA抗体被固定在羧基修饰磁性微球（MBs）表面；当样品中存在IAA时，抗体标记的AuNPs被抗体功能化MBs捕获，形成夹心复合物。加入二硫苏糖醇（...
本文报道了一种基于化学发光（CL）检测酶促生成过氧化氢（H2O2）的新型葡萄糖生物传感器。该传感器通过将葡萄糖氧化酶（GOD）、碳纳米管（CNTs）和金纳米粒子（GNPs）有效固定于 Nafion 膜中，并构建在石墨载体表面。作者系统考察了溶液 pH、酶作用时间、干扰物以及化学发光试剂浓度等实验参数对检测性能的影响。CNTs 和 G...
去甲基化药物可诱导癌细胞中异常沉默的抑癌基因去甲基化并重新激活，但也可能导致重复元件甲基化丢失等潜在有害效应。为观察与重复DNA去甲基化相关的药物不良效应，作者开发了一种可在活细胞中通过发光报告DNA可及性变化的新型生物传感器。该传感器由两个独立模块组成，每个模块均包含多指锌指结构域、半intein结构域和分裂荧光素酶结构域；当两个...
本文报道了一种基于化学发光成像和 poly(U) 聚合酶催化聚合的 microRNA（miRNA）高灵敏检测方法。将 3′-氨基修饰的 LNA-DNA 捕获探针通过 APTES 和戊二醛共价固定于盖玻片表面，并用 BSA 封闭。目标 miRNA 与探针杂交后，poly(U) 聚合酶以 miRNA 为模板催化 UTP 掺入，释放大量焦...
本文开发了一种紧凑、便携的化学发光生物传感器，用于玉米中伏马毒素（伏马毒素B1与B2之和）的现场快速、超灵敏定量检测。该传感器将基于酶催化化学发光检测的竞争性侧流免疫层析与高灵敏度便携式电荷耦合器件（CCD）相机相结合，并采用接触成像配置。与常规胶体金标记侧流免疫层析通常只能提供定性或半定量信息不同，化学发光检测可实现准确、客观的分...
本研究开发了一种基于1,10-草酰二咪唑化学发光（ODI-CL）检测的简易生物传感器，用于快速定量和筛查生奶及巴氏奶中的碱性磷酸酶（ALP），以判断市售牛奶是否经过充分巴氏消毒。含不同ALP活性的1.0%牛奶标准液及含1.0%生奶的样品与荧光素二磷酸（FDP）在室温下孵育15 min，ALP催化FDP水解生成荧光素。随后加入H2O2...
本文报道了一种基于流动注射分析（FIA）和1,10-草酰二咪唑化学发光（ODI-CL）检测的高灵敏生物传感器，用于定量乙酰胆碱（ACh）。该系统基于液体核心波导原理设计，可快速检测酶反应生成的发光产物。将 Tris-HCl（pH 8.5）中的 ACh 与含 1.0 U/mL 乙酰胆碱酯酶（AChE）、0.5 U/mL 胆碱氧化酶（C...
本文报道了一种稳健、选择性且高灵敏的化学发光（CL）蛋白检测平台。该方法以滚环扩增（RCA）作为信号增强策略，以96孔板作为固定与分离载体。典型流程中，先将抗体固定于96孔板表面，再与目标蛋白及适配体–引物序列形成夹心复合物；该适配体–引物序列随后作为RCA引物。基于此设计，可在孔板表面捕获大量生物素化探针及链霉亲和素–辣根过氧化物...
单核苷酸多态性（SNP）基因分型与癌症等疾病密切相关。本文报道了一种基于环状链置换扩增和磁性微球分离的室温高灵敏化学发光生物传感器，用于DNA点突变检测。氨基修饰发夹DNA探针经EDC/NHS偶联固定在羧基化磁性微球上，与生物素标记报告探针和目标DNA形成夹心结构。当突变型K-ras癌基因第12密码子目标DNA与探针完全匹配时，T4...