本文报道了欧盟第六框架计划BioCop项目中开发的一种表面等离子共振（SPR）生物传感器筛查方法，用于检测贝类中的麻痹性贝类毒素（PSP毒素），以替代日益存在伦理问题的鼠生物测定法。该方法将河鲀毒素结合蛋白（SBP）与固定河鲀毒素（STX）的芯片表面联用，并配合简单高效的样品前处理。按照欧盟决定2002/657/EC以及IUPAC和...
本章系统介绍表面等离子共振（SPR）生物传感器数据的动力学分析方法，旨在测定固定于传感器表面的配体与溶液中可溶分析物之间生物分子相互作用的亲和力及结合/解离速率常数。作者强调，在解释 SPR 结合曲线时必须明确并严格检验分析模型所隐含的假设，并讨论这些假设对实验设计、数据采集和对照设置的影响。SPR 表面结合动力学偏离理想双分子拟一...
表面等离子共振（SPR）生物传感器技术已趋于成熟，成为药物发现的重要工具。它是一种无标记生物物理技术，用于分子相互作用的动力学分析，可提供信息量极高的数据。近年来在灵敏度、实验设计、数据分析与样品通量方面的改进，使其适用于药物发现全过程。本文概述 SPR 生物传感器技术在小分子药物发现中的应用，并说明其如何与其他技术互补。该技术对基...
生物传感器是筛选生物活性化合物的重要工具。基于表面等离子共振（SPR）的光学生物传感器可在无标记条件下实时监测生物分子相互作用，适用于纯化合物和植物提取物等复杂体系。本文介绍 SPR 检测原理，并以白屈菜（Chelidonium majus L.）乙醇提取物为例，展示利用 SPR 筛选能与 DNA 相互作用的生物活性化合物的方法。实...
本文提出一种基于 Otto 激发构型的新型平面波导表面等离子体共振（SPR）生物传感器，并对其进行理论设计与优化。该器件由输入波导段、多层 SPR 传感段和输出波导段组成，分析物置于波导芯层与金膜之间的间隙中，形成类似 Otto 棱镜耦合的倏逝场激发结构，无需额外匹配层。作者采用带完美匹配层（PML）的本征模求解器 CAMFR，对间...
本研究利用表面等离子共振（SPR）建立了一种快速、无标记且灵敏的免疫分析方法，用于检测朊病毒蛋白（PrP）。将抗 PrP 单克隆抗体固定于生物传感器表面，使其与不同浓度细胞型朊病毒蛋白（PrPC）结合，随后注入可溶性抗 PrP 多克隆抗体以增强信号，并实时监测抗原-抗体相互作用。该方法在 HEPES-生理盐水中检测 PrPC 的检出...
开发了一种间接抑制型表面等离子共振（SPR）免疫分析方法用于检测微囊藻毒素（MCs）。将MC-LR与牛血清白蛋白（BSA）的生物偶联物通过胺键合固定于CM5传感器芯片表面。将MC-LR标准品或样品与单克隆抗体（mAb）预先混合后注入功能化芯片，剩余游离mAb被表面MC-LR-BSA捕获，并在BIAcore 3000生物传感器上实时监...
本研究通过噬菌体展示技术，从基于58个氨基酸的葡萄球菌蛋白A衍生Z结构域库中筛选出特异性结合人肿瘤坏死因子α（TNF-α）的affibody分子。TNF-α是参与多种炎症性疾病的促炎细胞因子，目前已有四种TNF-α阻断蛋白药物获批临床使用。经噬菌体筛选获得18个无半胱氨酸affibody序列，其中12个经序列聚类分析后选择为蛋白进行...
HER2（人表皮生长因子受体2，ErbB2）和EGFR（表皮生长因子受体）在多种癌症中过表达，且常共表达，同时靶向两者有望提高分子成像与治疗的效率和选择性。本研究将二价HER2结合Affibody分子（ZHER2:342）2与二价EGFR结合Affibody分子（ZEGFR:1907）2通过(G4S)3连接子基因融合，构建约30 k...
表面等离子共振（SPR）生物传感器是一类光学传感器，利用表面等离子极化激元探测溶液中分析物与固定在传感器表面的生物分子识别元件之间的相互作用。其主要应用包括生物分析物检测和生物分子相互作用分析，具有无标记、实时、可同时获得定性与定量信息以及相互作用动力学参数的优势。该技术已用于研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-脂质、蛋白质-核酸以及蛋白质...
表面等离子共振（SPR）生物传感器技术已成功用于蛋白质、药物、DNA 和微生物等多种分析物的检测。基于 SPR 的免疫传感器将特异性抗原-抗体反应与光学换能相结合，具有灵敏、特异、快速和无标记检测等优点，已成为细菌定量检测的有前景工具。本文综述了 SPR 免疫检测法用于细菌检测开发中的关键问题，重点讨论仪器系统、表面功能化、液体处理...
开发了一种免疫生物传感器方法，用于多种硝基咪唑化合物在不同物种和样品类型中的多残留筛查，包括猪、牛和羊肾、禽肝、血清、鸡蛋及牛乳。以甲硝唑蛋白偶联物免疫绵羊，制备了可结合至少七种主要硝基咪唑及其代谢物的多克隆抗体。样品匀浆用乙腈提取并微离心后进行生物传感器分析。对20个加标样品的验证表明，该方法对所有受试物种和基质中二甲硝咪唑（DM...
促生长剂在动物饲养中被非法使用，现有基于液相色谱-串联质谱和气相色谱-质谱的残留检测难以覆盖不断出现的新化合物及低剂量混合给药。本文提出以间接生物学证据作为筛查工具，通过检测血浆性激素结合球蛋白（SHBG）结合能力变化识别促生长剂处理动物。SHBG是结合并调控循环性激素水平的糖蛋白。作者建立基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器配...
本文报道了一种基于银镜反应增强表面等离子共振（SPR）生物传感器灵敏度的方法。作者先在金（Au）膜表面构建1,6-己二硫醇（HDT）自组装单层，再利用银镜反应在Au膜上沉积一层薄银（Ag）膜，形成Ag/Au复合膜。随后用3-巯基丙酸（MPA）自组装层连接Ag膜与生物识别元件，并通过EDC/NHS活化羧基固定兔抗人IgG抗体。该传感器...
TGF-β1、-β2和-β3序列同一性超过70%，结构几乎相同，但TGF-β2与TGF-β II型受体（TβR-II）的结合亲和力远低于TGF-β1和-β3。此前发现TGF-β1和-β3界面保守残基Arg25、Val92、Arg94负责高亲和结合。本研究通过单点、双点和三点突变构建TGF-β3失活及TGF-β2功能获得变体，并用一维...
表面等离子共振（SPR）生物传感器是一种无标记光学亲和传感技术，通过光学读取器激发金属薄膜表面的表面等离子体，其倏逝场对金属表面附近介质折射率变化敏感。当样品中的分析物与固定在传感器表面的生物识别元件（抗体、抗体片段、寡核苷酸、分子印迹聚合物等）特异性结合时，界面折射率改变，导致 SPR 共振角、共振波长或反射光强度发生变化，从而实...
表面等离子共振（SPR）生物传感器是蛋白质组学研究和药物发现中分析生物分子相互作用的重要工具，但用于小分子检测时灵敏度仍需提高。现有商用SPR系统多采用强度检测，受光源、光电接收器和放大电路漂移影响，检测精度通常不优于10^-6折射率单位（RIU）。由于SPR激发时反射光相位比强度变化更剧烈，相位检测可成为提高灵敏度的有效途径，理论...
合成了一种理性设计的睾酮寡聚乙二醇连接子偶联物，并共价固定于表面等离子共振（SPR）生物传感器表面。传感表面可稳定经历超过330次结合与再生循环，具有较高重复使用性。基于该表面，开发了用于缓冲液中睾酮的超灵敏免疫生物传感器系统，同时采用二级抗体和金纳米粒子信号增强。灵敏度提高源于结合质量增加及金等离子体耦合效应。与仅用一级抗体相比，...
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的无标记 DNA 突变筛查方法，用于遗传性乳腺癌相关 BRCA1 基因突变的早期检测。研究系统考察了横向间隔物、纵向间隔物以及不同杂交条件对完全互补链与错配链区分能力的影响，以优化 SPR 生物传感器对 DNA 杂交和突变识别的灵敏度与选择性。通过硫醇化学控制寡核苷酸探针在金表面的固定密度，...
c-Jun 是高度致癌转录因子，参与多种癌症发生。本研究从噬菌体展示的 Affibody 非免疫球蛋白支架蛋白文库中筛选结合 c-Jun 的亲和配体。在大肠杆菌中重组表达 c-Jun 同源二聚体，并通过 ELISA 验证其特异性结合含 c-Jun 应答元件的双链 DNA 发夹，不结合对照序列。经五轮噬菌体筛选，ZcJun518 在 ...