Sensors (Basel, Switzerland)
2010
Komaitis E, Vasiliou E, Kremmydas G, Georgakopoulos DG 等 5 人
本文报道了一种用于水毒性评估的全自动流动注射分析仪的开发。该分析仪以费氏弧菌(Vibrio fischeri)生物发光全细胞生物传感器为核心,通过检测重金属溶液对细菌生物发光的抑制来评估毒性。实验中将100 μL费氏弧菌悬液注入含不同浓度Pb2+、Hg2+和Cu2+的载液中,菌体在混合线圈中与毒性载液混合后进入检测单元。以去离子水注...
Bioengineered bugs
2010
Yagur-Kroll S, Bilic B, Belkin S
遗传工程微生物报告菌株通过诱导型启动子与报告基因融合,在暴露于目标化合物或应激因子时产生剂量依赖信号。本文评论增强生物发光细菌传感器性能的通用策略,包括优化启动子区 DNA 片段长度、随机或定点突变以及启动子重复/串联。作者以大肠杆菌中 sulA::luxCDABE 和 grpE::luxCDABE 融合为例,检测萘啶酸等 SOS ...
Clinical chemistry
2010
Alloush HM, Anderson E, Martin AD, Ruddock MW 等 10 人
阿糖胞苷(Ara-C)是治疗急性髓系白血病(AML)的关键药物,但最多30%患者治疗无反应,因此需要治疗前筛选患者血样以预测药物反应。本研究通过转座突变构建胞苷脱氨酶(cdd)缺陷的大肠杆菌MG1655突变体,使其对Ara-C敏感,并转化携带Photorhabdus luminescens luxCDABE操纵子的质粒,构建自发光全...
Journal of biotechnology
2010
Shin HJ
NahR 是萘降解途径中响应水杨酸的转录调控因子,是检测萘和水杨酸的微生物生物传感器核心元件。为最大化传感器灵敏度,作者通过定点突变 nahR 基因进行理性设计,在已知参与中心诱导剂识别和 C 端多聚化的第 169 位和第 248 位构建 8 个单突变体(N169A、N169C、N169K、N169S、R248H、R248M、R24...
Photochemistry and photobiology
2010
Zeinoddini M, Khajeh K, Behzadian F, Hosseinkhani S 等 6 人
本研究构建并表征了一种基于水母素(aequorin)的大肠杆菌 JM109 全细胞生物传感器,用于检测水溶液中的甲苯及其相关化合物。该传感器以 pGL2 质粒为基础,携带假单胞菌 mt-2 xyl 操纵子下路启动子 Pu、转录激活因子 xylR 以及融合的水母素 cDNA,命名为 pGL2-aequorin。当 XylR 蛋白结合甲...
Food additives & contaminants. Part A, Chemistry, analysis, control, exposure & risk assessment
2010
Pikkemaat MG, Rapallini ML, Karp MT, Elferink JW
四环素在兽医领域广泛使用,动物源性食品中残留监测需要快速、低成本的高通量筛查方法。本文对一种已建立的发光细菌细胞生物传感器方法进行了大规模现场评价,使用超过300份常规禽肉样品,并与微生物抑制法平行比较。细胞生物传感器法检出的可疑样品比例明显更高,为10.2%,而抑制法为2%;所有可疑样品均经液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)确...
DNA and cell biology
2010
Cardemil CV, Smulski DR, Larossa RA, Vollmer AC
河口系统中磷酸盐和氨的积累及其引发的甲藻与藻华,已被认为与鱼类死亡及渔民健康风险有关。分析化学试剂盒常用于测定水样中磷酸盐和氨水平,但其灵敏度受限于仅针对这些物质的无机形式。本研究构建了一种大肠杆菌生物发光报告系统,将大肠杆菌启动子 phoA 或 glnAp2 与费氏弧菌 luxCDABE 操纵子融合,载体位于染色体或多拷贝质粒上,...
Journal of microbiological methods
2010
Välimaa AL, Kivistö AT, Leskinen PI, Karp MT
本研究开发了一种利用生物发光全细胞生物传感器检测牛奶中雌激素样霉菌毒素残留的方法。将不同组成的乳制品加标雌激素霉菌毒素玉米赤霉烯酮(zearalenone)及其代谢物 zearalanone、α-zearalanol、β-zearalanol、α-zearalenol 和 β-zearalenol。雌激素反应由遗传改造的酿酒酵母全细...
Journal of microbiological methods
2009
Li C, Wang H, Zhou L, Zhang Y 等 6 人
本研究利用遗传工程 Acinetobacter baylyi ADP1 菌株 ADPWH_lux,定量测定培养基 pH 对 sal 操纵子调控的影响。该菌株在染色体 sal 操纵子中携带 salA 基因与无启动子 luxCDABE 生物发光基因盒的融合,受 LysR 型转录调控因子 SalR 调控,可在水杨酸诱导下产生生物发光。活细...
Environmental pollution (Barking, Essex : 1987)
2009
Paton GI, Reid BJ, Semple KT
尽管多项综述认为微生物生物传感器可用于环境监测,但实际应用中仍较少,原因之一是多数传感器依赖水相缓冲体系,难以直接匹配真实环境基质。本研究评估了多种非穷尽提取技术(NEETs)与萘响应生物传感器的兼容性及其与萘生物降解的相关性。所用传感器为lux标记的Pseudomonas fluorescens HK44 pUTK21,可定量响应...
Environmental pollution (Barking, Essex : 1987)
2009
Nissen S, Alexander BD, Dawood I, Tillotson M 等 7 人
可见光驱动的光电催化(PEC)技术有望用于处理受有机异生物质污染的水体。本研究采用三室批式 PEC 反应器,以三氧化钨(WO3)薄膜光电极为阳极,在可见光(450–650 nm)照射下降解模型污染物 2,4-二氯苯酚(2,4-DCP),并同时用化学分析和毒性生物传感评估其降解性能。毒性评估采用多拷贝质粒 lux 标记的大肠杆菌 HB...
Plant methods
2008
Defraia CT, Schmelz EA, Mou Z
水杨酸(SA)是植物抵御生物营养型病原菌的重要信号分子,也参与产热、开花和萌发等过程。植物体内 SA 以游离态和生物惰性的葡萄糖结合态(水杨酸 2-O-β-D-葡萄糖苷,SAG)存在。Huang 等开发了仅响应游离 SA 而不响应 SAG 的细菌生物传感器 Acinetobacter sp. ADPWH_lux。本文基于该传感器建立...
Journal of agricultural and food chemistry
2008
Virolainen NE, Pikkemaat MG, Elferink JW, Karp MT
本研究采用四环素特异性发光细菌生物传感器 TetLux,建立了一种快速检测鸡肉肌肉组织中四环素类残留的方法,并通过膜通透剂多粘菌素B(PMB)和螯合剂EDTA对检测体系进行增敏,使其满足欧盟对禽肉肌肉中四环素类残留100 µg/kg最大残留限量(MRL)的筛查要求。优化后,多西环素(DC)检出限为5 ng/g,金霉素(CTC)为7....
Biosensors & bioelectronics
2008
Daniel R, Almog R, Ron A, Belkin S 等 5 人
全细胞生物传感器可用于在线和原位环境监测。本文提出一种基于遗传工程大肠杆菌的全细胞生物发光生物传感器,用于水毒性检测。该菌株携带 recA::luxCDABE 启动子-报告基因融合,以 SOS 响应识别毒素。采用 Geiger 模式工作的单光子雪崩光电二极管(SPAD)实现高灵敏度光学检测。作者建立了描述大肠杆菌生物发光 SOS 毒...
BMC biotechnology
2008
Bernier SP, Beeston AL, Sokol PA
细菌利用 N-酰基高丝氨酸内酯(AHL)分子以密度依赖方式调控基因表达。目前已开发多种生物传感器用于检测各类 AHL。本研究描述了一种基于 traI-luxCDABE 的生物传感器,用于快速检测 Burkholderia cenocepacia 和 Pseudomonas aeruginosa 已表征突变株中的 AHL,并可在液体和...
Biosensors & bioelectronics
2008
Niazi JH, Kim BC, Ahn JM, Gu MB
本研究利用大肠杆菌 pgi 基因启动子与 luxCDABE 报告子融合,构建了一种新型氧化应激响应型细菌生物发光生物传感器 PGRFM。该菌株对模型氧化还原化学物质甲基紫精(MV)呈剂量依赖性响应。PGRFM 对氧化还原化学物质的响应强烈依赖于可用碳源:在葡萄糖或葡萄糖酸盐营养限制条件下,可响应低浓度 MV(0.6–19.3 ppm...
Journal of microbiological methods
2008
Birmele M, Ripp S, Jegier P, Roberts MS 等 6 人
本文报道了一种用于环境样品中大肠杆菌直接检测的双组分噬菌体生物发光报告系统。该系统由整合 luxI 基因的 lambda 噬菌体和基于 lux 的生物发光报告细胞组成,通过酰基高丝氨酸内酯(AHL)介导的群体感应和生物发光信号刺激响应噬菌体感染事件。研究重点考察了两个分析挑战:一是存在产生内酯酶的非目标菌可能中断 AHL 信号传导,...
Current microbiology
2008
Tamagnini I, Guglielmetti S, Mora D, Parini C 等 6 人
本研究将环境菌地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)51.5 分别用携带昆虫荧光素酶基因 lucFF 的穿梭质粒 pCSS810 和携带绿色荧光蛋白基因 gfp 的穿梭质粒 pGFPratiometric 进行电转化,获得生物发光和绿色荧光重组株。随后用不同抗菌剂处理细胞,并测量其生物发光与荧光。结果显示,携带...
International journal of food microbiology
2008
Guglielmetti S, Ciranna A, Mora D, Parini C 等 5 人
本研究旨在构建一种可用于分析细胞代谢状态的双歧杆菌生物传感器。作者通过电穿孔将携带叩头虫(Pyrophorus plagiophthalamus)昆虫荧光素酶基因的人源肠道菌长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum biovar longum)进行转化,所用载体为pGBL8b,并研究了影响该生物发光表型产光的基...
Applied microbiology and biotechnology
2008
Fu YJ, Chen WL, Huang QY
本研究以细菌荧光素酶基因 luxCDABE 为报告基因,以无质粒假单胞菌 Pseudomonas putida X4 和产气肠杆菌 Enterobacter aerogenes NTG-01 为宿主,构建了两个 Hg2+ 特异性生物传感器,并在相同检测条件下比较其性能。结果表明,X4 生物传感器的最大生物发光出现在指数生长期中期,N...