本研究考察气动喷雾在玻璃表面形成薄抗体膜作为捕获病原目标的潜在固定化技术。以山羊抗大肠杆菌O157:H7 IgG经气动喷雾制备抗体膜，并与亲和素-生物素桥固定化膜比较，使用GFP转化大肠杆菌O157:H7细胞和荧光报告抗体进行检测。测试了膜的功能性、稳定性和固定化效果。气动喷雾膜荧光强度低于亲和素-生物素桥膜，但在10^5–10^7...
组织转谷氨酰胺酶2（TG2）是广泛表达的转谷氨酰胺酶家族成员，可介导多种蛋白底物之间的转酰胺化反应，并作为具有GTP酶活性的G蛋白发挥作用。在GDP/GTP结合及细胞内钙水平升高时，TG2可发生显著构象变化，并相互调节其酶活性。本研究构建了一种TG2生物传感器，利用Förster共振能量转移（FRET）结合荧光寿命成像显微镜（FLI...
本文报道了一种基于聚合物点与金纳米粒子间荧光共振能量转移（FRET）的癌胚抗原（CEA）荧光生物传感器。以聚(9,9-二辛基芴-2,7-二基)点（PFO dots）作为高亮发光体，金纳米粒子（Au-NPs）作为猝灭剂，通过单链DNA（ssDNA）杂交构建三明治结构。CEA适配体连接PFO dots与Au-NPs，使PFO dots荧...
本文制备了一种纳米尺度RGD-吡烯-氧化石墨烯（GO）生物传感器，用于实时原位检测癌细胞表面标志物整合素αvβ3。该传感器利用GO对吡烯荧光的猝灭作用：RGD-吡烯共轭物通过π-π相互作用和疏水作用非共价吸附于GO表面，使吡烯荧光处于关闭状态；当整合素αvβ3竞争性结合RGD配体时，RGD-吡烯从GO表面解离，吡烯荧光恢复，且恢复强...
本文设计了一种新型荧光生物传感器，利用阳离子共轭聚合物的信号放大效应灵敏筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂（AGIs）。阳离子聚芴苯（PFP）在380 nm激发下于422 nm发射蓝色荧光；当体系中存在对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（PNPG）和α-葡萄糖苷酶时，酶水解PNPG生成4-硝基酚，4-硝基酚通过静电作用与PFP靠近并猝灭其荧光；...
本文报道了由蛋白、儿茶素（(+)-或(-)-表型）和Tb(III)在生理pH 6.8水相缓冲液中组成的三元体系，可表现出高效“天线效应”。通过稳态与时间分辨发射研究蛋白-Tb(III)、儿茶素-Tb(III)二元复合物及三元体系，并结合分子对接，发现高效敏化主要源于Tb(III)微环境被有效屏蔽，减少O-H振子引起的振动耦合猝灭，同...
肉豆蔻酰化丙氨酸富集 C 激酶底物（MARCKS）是调控血管内皮细胞迁移与细胞骨架信号的肌动蛋白结合蛋白，但其在血管紧张素 II（Ang-II）信号中的作用尚不清楚。本研究通过免疫组化、免疫印迹、基因编码荧光生物传感器活细胞成像及 siRNA 敲低等生化与细胞成像方法，发现完整动脉组织中 MARCKS 主要表达于内皮层；在内皮细胞中...
本文报道了一种基于磷脂在非氧化石墨烯表面自组装形成的磷脂-石墨烯纳米组装体。该组装体通过脂质尾部与石墨烯之间的非共价疏水作用制备，不破坏石墨烯片层内的电子共轭结构，因而保留其优良电学与光学性能，同时磷脂包覆赋予其良好生物相容性、易溶性和可控表面修饰能力。结构表征表明，还原氧化石墨烯片层被磷脂双层包裹，形成平面细胞膜模拟物。利用荧光素...
我们开发了一种在体相水溶液中检测蛋白–小分子及蛋白–离子相互作用的技术。该方法将 pH 敏感荧光染料 5-(和-6)-羧基荧光素偶联到指定捕获蛋白表面的游离赖氨酸残基上。由于染料周围局部电场随配体结合而改变，其表观 pKa 发生变化，导致荧光强度改变；小分子结合和离子结合分别引起约 6% 和 15% 的荧光变化。该变化可源于分析物电...
结构转换荧光信号DNA和RNA适配体已被报道为生物传感器开发中高度通用的分子识别元件。虽然结构转换DNA适配体已用于固相传感，但等效RNA适配体由于化学稳定性差且易受核酸酶攻击，尚未成功用于固相传感器。本研究考察将结构转换荧光信号RNA适配体报告分子包埋到溶胶-凝胶衍生有机无机复合材料中，作为固相固定化平台，并以合成茶碱结合和天然焦...
钙是通用信使，可将多种环境刺激和发育信号转化为特定细胞与发育反应。真菌虽普遍依赖 Ca2+ 信号调控生长、发育和致病，但缺乏可在单细胞水平成像亚细胞 Ca2+ 时空动态（即 Ca2+ 特征）的稳健方法，限制了相关研究。本文报道首次在真菌中成功表达基于 FRET 的 Ca2+ 生物传感器 Cameleon YC3.60。对表达该传感器...
基于叶酸（FA）与叶酸受体（FR）之间的特异性相互作用，本研究提出一种用于检测FR的荧光生物传感器。将3'端氨基标记的55-mer寡核苷酸在含Mg²⁺溶液中退火形成茎环结构，其5'端富含鸟嘌呤区可作为G-四链体来源，3'端通过共价连接叶酸形成FA-DNA小分子嵌合体。喹啉红（QR）本身荧光较弱，但与G-四链体结合后荧光显著增强。当F...
在哺乳动物视网膜中，光感受器外段（POS）的终身更新依赖昼夜节律性远端杆状 POS 尖端脱落，以及随后视网膜色素上皮（RPE）在光启动后对其吞噬。促进或同步 POS 尖端脱落的分子机制尚不清楚。本研究通过抗体、annexin V 和 pSIVA（polarity-sensitive indicator of viability an...
本文报道一种基于能量迁移的微结构荧光生物传感器，用于选择性检测金属蛋白。通过再沉淀法将共轭苯乙烯 3B2B 与荧光酮衍生物 DSFO 共沉淀制备水溶性荧光微球（DMPs）。3B2B 作为能量供体，DSFO 作为受体掺杂其中，二者吸收/发射光谱重叠，发生高效 Förster 共振能量转移，使 DMPs 的 3B2B 蓝色荧光显著降低而...
治疗性抗体通常被工程化或筛选为具有极高的靶点结合亲和力，而多数生物物理方法难以精确测定。本文以抗 Dickkopf（DKK）单克隆抗体 DS4 与一组 DKK 抗原的相互作用为模型，探索动力学排除法（KinExA）的动态范围。通过针对每种抗原定制 KinExA 条件，作者获得了跨越六个数量级的表观平衡解离常数（KD），约从 100 ...
既往利用膜联蛋白V研究外翻磷脂酰丝氨酸（PS）在凋亡和凝血中的作用，但膜联蛋白不能进入细胞，且在低钙下不能结合PS，因此正常细胞内膜系统PS的拓扑分布与动力学知之甚少。本研究采用两种新探针：绿色荧光蛋白（GFP）-LactC2，一种遗传编码的荧光PS生物传感器；以及1-棕榈酰-2-(二吡咯甲烷硼二氟)十一酰-sn-甘油-3-磷酸-L...
线粒体pH是线粒体能量代谢的关键决定因素。本研究开发了一种基于氯离子不敏感且氢离子敏感探针的新型荧光比率型pH生物传感器，用于活细胞中直接、定量且无光漂白地测量线粒体pH。该探针由氢离子敏感的Venus H148V突变体与氢离子不敏感的GFPuv融合而成，并融合线粒体定位信号形成MTpHGV。将MTpHGV稳定转染至大鼠INS-1和...
蛋白质图案化在生物传感器、生物MEMS、组织工程、细胞生物学和蛋白质组学研究中具有重要作用。本文开发了一种简单有效的蛋白质图案化技术，利用大孔聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)(PHEMA)水凝胶微图案作为三维模板固定蛋白质。通过结合胶体晶体模板法与光刻，在聚乙二醇(PEG)涂层硅基底上制备了具有反蛋白石结构的大孔水凝胶微图案。所得反蛋白...
锌离子在缺血性卒中、癫痫持续状态和创伤性脑损伤后的细胞毒性作用仍有争议，但可能源于线粒体功能障碍。本文报道了一种基于人碳酸酐酶II（CA II）变体的激发比率荧光生物传感器，并将其表达于线粒体基质，用于定量成像其中的游离锌水平。在PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞培养系中，作者测得线粒体基质平均游离锌浓度约为0.2 pM。随后在细胞氧葡萄糖...
近年来，基于 Pb2+ 特异性 RNA 切割 DNA 酶的 Pb2+ 生物传感器较多，但常因成本高、操作复杂及 RNA 不稳定而限制实际应用。本研究提出一种基于 Pb2+ 诱导变构 G-四联体（PS2.M）的无标记荧光生物传感器用于 Pb2+ 检测。在 K+ 存在下，N-甲基原卟啉 IX（NMM）可与 K+ 稳定的 G-四联体结合，...