表面等离子共振（SPR）生物传感器因无需标记、可实时测量生物分子相互作用而具有优势。本文描述了一种在链霉亲和素（SA）修饰传感器芯片表面杂交 RNA 以研究 RNA-蛋白相互作用的方法。通过生物素化 DNA 探针固定于 SA 芯片，体外转录的 SARS-CoV RNA 与探针互补区杂交，使 5' leader 序列暴露于溶液侧；随后...
本文报道了一种用于生物反应器培养过程中线边（at-line）监测生物活性抗体浓度的创新方法。所谓生物活性抗体指保留抗原结合活性的抗体。研究首先利用表面等离子共振（SPR）生物传感器技术，在离线条件下对500 mL摇瓶杂交瘤细胞培养条件培养基中生物活性抗体浓度进行监测，以验证SPR测量条件。随后构建全自动实验系统，将SPR生物传感器与...
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器，用于在Biacore 2000仪器上检测溶液中的碳水化合物结合蛋白（CBPs）。该传感器以固定化糖肽作为识别配体，糖肽的筛选基于此前利用蓖麻凝集素（RCA120）和人类黏附/生长调控半乳糖凝集素-1（h-Gal-1）对固相糖肽库进行的系统筛选。糖肽被固定化在经混合烷硫醇自组装单...
本研究首次利用石英晶体微天平（QCM）生物传感器快速筛选分析，证明三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液与溶菌酶（LZM）之间存在特异性相互作用。该现象在表面等离子共振（SPR）系统中同样被观察到。进一步采用高效亲和色谱（HPAC）确认 LZM 与固定化 Tris 之间的特异性结合，表观解离常数 KD 为 6.7×10^-5 M。分子对...
DNA探针的固定化是DNA生物传感器开发中的关键步骤。混合DNA/烷硫醇自组装膜常被用于将DNA探针共价偶联到传感器表面，但引入间隔基以增加特定DNA序列与表面距离的效果很少被系统评估。本研究旨在评价多种间隔基，并考察其对灵敏度、重现性等性能的影响。除常用的巯基己基（C6）间隔基外，还选择了更长的巯基十一烷基（C11）间隔基，并研究...
本文设计并制备了一种基于电位法测量的生物场效应晶体管（BioFET）白蛋白生物传感器，并系统考察了其传感特性。该BioFET采用半导体集成电路（IC）工艺制备，其栅极表面通过新开发的自组装单分子层（SAM）进行化学修饰；该SAM由噻唑苯冠醚乙胺-硫辛酸（TBCEA–thioctic acid）构建，用于固定抗白蛋白抗体。利用表面等离...
本文报道了一种利用金黄色葡萄球菌 sortase A（SrtA）转肽酶活性将蛋白定点共价固定到 Biacore 传感器芯片的新方法。Biacore 是基于表面等离子共振（SPR）的实时生物传感器，可分析蛋白结合特异性、动力学和亲和力。作者先在 CM5 芯片的羧甲基葡聚糖表面通过 EDC/NHS 活化和 PDEA 硫醇偶联固定三甘氨酸...
本文评估了ForteBio Octet光学生物传感器在蛋白相互作用动力学与亲和力测定中的应用。Octet基于生物层干涉（BLI），使用一次性光纤传感器尖端，从开放振荡微孔板中直接取样，无需微流控。作者以抗CGRP单克隆抗体4901及其Fab片段为模型，比较Octet与Biacore 3000和ProteOn XPR36两种表面等离子...
近年来，干燥综合征（Sjögren’s syndrome, SS）患者血清中可检出针对毒蕈碱型 M3 受体（M3R）的自身抗体，但与 SS 免疫球蛋白 G（IgG）相互作用的 M3R 精确表位仍不清楚。本研究旨在鉴定与 SS IgG 结合并影响 M3R 功能的功能性表位。作者从 7 例 SS 患者（6 例原发性、1 例继发性）和 2...
表面等离子共振（SPR）技术与 Biacore 生物传感器已被广泛用于实时测量流体相中生物分子相互作用的动力学。近十年来，该检测进一步扩展到两个相对表面上锚定分子之间的反应动力学，但细胞结合动力学仍缺乏定量描述。本文报道了一种细胞动力学模型，并建立了相应的细胞结合动力学测量与数据分析流程，用于预测每个细胞的结合速率。实验以牛血清白蛋...
本文报道了一种基于胶体金的局域表面等离子共振（LSPR）生物传感器的系统制备与性能研究。玻璃基底经化学硅烷化修饰，通过混合硅烷和选择性混合优化控制金胶体密度。样品暴露于生物试剂后，利用暗场光谱监测金颗粒周围浅层介电常数变化。作者首先以生物素/链霉亲和素体系验证传感原理，并优化包被层和受体浓度，最终用于定量检测小分子合成同化激素司坦唑...
病毒RNA基因组由病毒复制酶进行复制，是病毒感染周期的核心过程。多数RNA病毒编码一个或多个自身基因组翻译蛋白，用于组装病毒复制酶复合体，该复合体包含病毒RNA、病毒蛋白以及被劫持的宿主蛋白，并嵌入细胞膜中。理解复制蛋白的多种生化活性有助于识别干预靶点，以控制病毒感染或减轻宿主细胞损伤。本文以番茄花叶小矮病毒（TBSV）复制蛋白为模...
表面等离子共振（SPR）生物传感器在将RBL-2H3肥大细胞培养于传感芯片并用抗原刺激时，可检测到共振角（AR）的显著变化，但导致这种大AR变化的分子事件尚不清楚。本研究通过遗传操纵细胞内信号分子，探讨抗原诱导的细胞内信号事件与AR变化之间的关系。过表达显性负性Syk或SLAP的RBL-2H3细胞在抗原刺激后AR仅轻微增加；过表达显...
血小板内皮细胞黏附分子1（PECAM-1，CD31）是免疫球蛋白超家族细胞黏附分子，含六个Ig样结构域，参与炎症时白细胞外渗和血管内皮完整性维持。尽管已知PECAM-1通过结构域1同型结合介导细胞黏附，但已有多种异型配体被提出。本研究重新考察肝素和硫酸乙酰肝素（HS）是否为PECAM-1配体。PECAM-1外源域先以与人IgG1 F...
成功的亲和生物传感器很大程度上取决于换能系统与生物受体间的化学界面层。过去十年，金表面烷硫醇自组装单分子层（SAM）被广泛用于构建生物传感界面，含聚环氧乙烷（PEO）硫醇的混合 SAM 也常用于固定生物受体。然而，此类 SAM 的生物传感性能与长期稳定性之间的关系仍了解有限，储存条件的影响此前未见报道。本文制备混合 PEO-硫醇 S...
在生物传感器开发中，将生物试剂精确图案化到基底上是关键步骤，许多应用要求以高精度重复沉积多种试剂，实现多分析物检测。本文展示了一种压电喷墨打印系统，能够在水性和非水性试剂中创建亚毫米级（最小约150 μm）图案，并实现精确放置，用于生物传感器应用。图案的尺寸、形状和密度可通过简单调整打印参数改变。作者用该系统演示了两种用于生物传感器...
IL5和GM-CSF的受体激活是一个顺序过程，依赖于细胞因子与特异性α亚基结合并招募共同信号转导βc亚基。为阐明这些受体亚基的组装动力学，作者利用表面等离子共振（SPR）生物传感器对细胞因子-受体复合物形成进行动力学相互作用分析。通过构建C端融合V5标签的受体胞外区可溶性蛋白，建立了在SPR芯片表面共锚定α和βc亚基的检测方法。结果...
食品安全是消费者、生产者和监管机构长期关注的问题。从农场到餐桌的供应链安全必须得到保障，以防止食源病原体暴发造成严重健康损害。危害分析关键控制点（HACCP）等预防策略需要快速、灵敏、准确的检测工具支持，才能充分发挥作用。传统微生物培养方法虽然可靠，但耗时长、操作繁琐，难以匹配现代食品生产速度和短保质期产品的实时监测需求，也难以自动...
本研究利用噬菌体展示技术，从基于58个氨基酸Protein A衍生Z结构域的组合蛋白库中筛选出特异性结合人白细胞介素-2受体α亚基（IL-2Rα/CD25）的Affibody®分子。IL-2R系统参与T细胞活化与免疫应答调节，CD25在器官排斥、自身免疫病和T细胞恶性肿瘤中过表达。以Fc融合靶蛋白进行噬菌体展示筛选，共获得16个独特...
硫酸乙酰肝素（HS）通过与肝素结合生长因子相互作用调控其生物活性，这种作用依赖硫酸化模式和糖醛酸异构体结构。HS 6-O-硫酸化由三种 HS6-O-硫酸基转移酶催化。作者构建了 HS6ST-1 和/或 HS6ST-2 缺陷小鼠。取自 E14.5 双敲除（dKO）小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）产生的 HS 几乎不含 6-O-硫酸基，而...