生物发光反应以萤光素、Mg2+-ATP 和分子氧为底物，在萤光素酶催化下生成电子激发态氧化萤光素并释放可见光。萤光素酶最具前景的应用之一是生物传感器。为开发基于半胱天冬酶3/7（caspase 3/7）的凋亡生物传感器，作者通过重叠延伸 PCR 构建了 3 种 Photinus pyralis 萤光素酶的环状置换变体 CP-1、CP...
本研究评估一种可在一个工作日内检测白血病细胞内阿糖胞苷三磷酸（Ara-CTP）水平的体外生物传感器方法。阿糖胞苷是急性髓系白血病常用药物，其细胞毒性主要依赖活性代谢物 Ara-CTP。该传感器采用生物发光、嘧啶依赖且胞苷脱氨酶缺陷的大肠杆菌突变株，将经阿糖胞苷单独或联合氟达拉滨处理的白血病细胞裂解液与传感器共孵育，通过碱性磷酸酶处理...
测量活细胞或生物体内的蛋白酶活性仍具挑战性。本文报道一种转基因编码生物传感器，可高灵敏、高特异报告炎症小体激活过程中 caspase-1 及其他蛋白酶的蛋白水解活性。该蛋白酶报告系统基于前体白介素-1β（pro-IL-1β）与 Gaussia 荧光素酶（GLuc）融合蛋白 iGLuc 的生物学特性：pro-IL-1β 依赖性的蛋白聚...
本研究开发了一种基于适配体的化学发光（CL）方法，用于高选择性和高灵敏度检测血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）。兔抗人PDGF-BB多克隆抗体通过共价偶联固定在具有反应性N-羟基琥珀酰亚胺酯（NOS）基团的96孔板表面。当存在目标蛋白时，生物素化适配体被捕获，形成抗体/PDGF-BB/生物素化适配体三明治复合物；随后链霉亲和素...
受体鸟苷酸环化酶参与多种病理生理过程，是重要的药物靶点。本文报道三种颗粒型鸟苷酸环化酶（pGC）报告细胞系的构建与药理学表征。编码利钠肽受体GC-A、GC-B和热稳定肠毒素受体GC-C的质粒被稳定转染至表达环核苷酸门控（CNG）阳离子通道的父代报告细胞系中，该通道作为胞内cGMP的生物传感器。由此可在活细胞中实时监测pGC活性。利用...
本研究开发了一种由 F0F1-ATPase 转子调控的新型免疫旋转生物传感器，用于快速检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）。该传感器以紫膜体中的 F0F1-ATPase 为分子马达换能器，通过 e 亚基单克隆抗体—生物素—中性亲和素—生物素连接子，将 DON 单克隆抗体连接至 F0F1-ATPase 的 e 亚基上，从而捕获 DON 残...
本文报道了一种高灵敏化学发光（CL）方法，用于检测植物激素吲哚-3-乙酸（IAA）。该方法以G-rich DNA标记的金纳米颗粒（AuNPs）作为化学发光探针，并结合DNA信号放大技术。IAA抗体被固定在羧基修饰磁性微球（MBs）表面；当样品中存在IAA时，抗体标记的AuNPs被抗体功能化MBs捕获，形成夹心复合物。加入二硫苏糖醇（...
本文报道了一种基于化学发光（CL）检测酶促生成过氧化氢（H2O2）的新型葡萄糖生物传感器。该传感器通过将葡萄糖氧化酶（GOD）、碳纳米管（CNTs）和金纳米粒子（GNPs）有效固定于 Nafion 膜中，并构建在石墨载体表面。作者系统考察了溶液 pH、酶作用时间、干扰物以及化学发光试剂浓度等实验参数对检测性能的影响。CNTs 和 G...
去甲基化药物可诱导癌细胞中异常沉默的抑癌基因去甲基化并重新激活，但也可能导致重复元件甲基化丢失等潜在有害效应。为观察与重复DNA去甲基化相关的药物不良效应，作者开发了一种可在活细胞中通过发光报告DNA可及性变化的新型生物传感器。该传感器由两个独立模块组成，每个模块均包含多指锌指结构域、半intein结构域和分裂荧光素酶结构域；当两个...
本文报道了一种基于化学发光成像和 poly(U) 聚合酶催化聚合的 microRNA（miRNA）高灵敏检测方法。将 3′-氨基修饰的 LNA-DNA 捕获探针通过 APTES 和戊二醛共价固定于盖玻片表面，并用 BSA 封闭。目标 miRNA 与探针杂交后，poly(U) 聚合酶以 miRNA 为模板催化 UTP 掺入，释放大量焦...
本文开发了一种紧凑、便携的化学发光生物传感器，用于玉米中伏马毒素（伏马毒素B1与B2之和）的现场快速、超灵敏定量检测。该传感器将基于酶催化化学发光检测的竞争性侧流免疫层析与高灵敏度便携式电荷耦合器件（CCD）相机相结合，并采用接触成像配置。与常规胶体金标记侧流免疫层析通常只能提供定性或半定量信息不同，化学发光检测可实现准确、客观的分...
本研究开发了一种基于1,10-草酰二咪唑化学发光（ODI-CL）检测的简易生物传感器，用于快速定量和筛查生奶及巴氏奶中的碱性磷酸酶（ALP），以判断市售牛奶是否经过充分巴氏消毒。含不同ALP活性的1.0%牛奶标准液及含1.0%生奶的样品与荧光素二磷酸（FDP）在室温下孵育15 min，ALP催化FDP水解生成荧光素。随后加入H2O2...
本文报道了一种基于流动注射分析（FIA）和1,10-草酰二咪唑化学发光（ODI-CL）检测的高灵敏生物传感器，用于定量乙酰胆碱（ACh）。该系统基于液体核心波导原理设计，可快速检测酶反应生成的发光产物。将 Tris-HCl（pH 8.5）中的 ACh 与含 1.0 U/mL 乙酰胆碱酯酶（AChE）、0.5 U/mL 胆碱氧化酶（C...
本文报道了一种稳健、选择性且高灵敏的化学发光（CL）蛋白检测平台。该方法以滚环扩增（RCA）作为信号增强策略，以96孔板作为固定与分离载体。典型流程中，先将抗体固定于96孔板表面，再与目标蛋白及适配体–引物序列形成夹心复合物；该适配体–引物序列随后作为RCA引物。基于此设计，可在孔板表面捕获大量生物素化探针及链霉亲和素–辣根过氧化物...
单核苷酸多态性（SNP）基因分型与癌症等疾病密切相关。本文报道了一种基于环状链置换扩增和磁性微球分离的室温高灵敏化学发光生物传感器，用于DNA点突变检测。氨基修饰发夹DNA探针经EDC/NHS偶联固定在羧基化磁性微球上，与生物素标记报告探针和目标DNA形成夹心结构。当突变型K-ras癌基因第12密码子目标DNA与探针完全匹配时，T4...
本文开发了一种基于化学发光的生物芯片阵列传感技术，用于筛查蜂蜜中禁用硝基呋喃抗生素残留。采用多重检测策略，将分别针对四种主要硝基呋喃代谢物的特异性抗体点样于生物芯片离散测试区，以竞争免疫分析格式和化学发光响应实现同时检测。该方法按欧盟法规2002/657/EC进行验证，并与134个全球来源蜂蜜样品的UHPLC–MS/MS结果进行比较...
本文报道了一种无标记、基于适配体的化学发光生物传感器。该传感器利用未修饰金纳米颗粒（AuNPs）对鲁米诺–过氧化氢（luminol–H2O2）化学发光（CL）反应的催化活性，以及未修饰AuNPs与适配体之间的相互作用。未修饰AuNPs能够有效区分无结构的单链适配体与折叠后的适配体。在0.5 mol/L NaCl存在下，适配体与靶标分...
本研究首次将化学发光（CL）方法与纸基微流控分析装置（μPAD）相结合，建立了一种新型 CL μPAD 生物传感器，用于尿酸的定量检测。该传感器基于酶促反应：尿酸氧化酶在分解尿酸底物时产生过氧化氢（H2O2），随后 H2O2 在酸性介质中与罗丹宁衍生物发生化学发光反应。μPAD 中的微通道采用切割法制备，并阐明了该 CL μPAD ...
本研究设计了一种新型微流控纸基化学发光分析装置（mPCAD），可同步、快速、灵敏且定量地检测葡萄糖和尿酸。该纸基实验室生物传感器基于氧化酶反应（葡萄糖氧化酶 GOx 和尿酸氧化酶 UOx）以及罗丹宁衍生物与酸性介质中生成的过氧化氢之间的化学发光反应。文中解释了 mPCAD 可能的化学发光检测原理，并发现通过改变葡萄糖和尿酸样品在纸基...
常规光电化学测量必须依赖物理光源，而不同光电活性材料的激发波长不同，常需单色器，使仪器复杂且不利于便携化。本文首次提出以化学发光反应替代物理光源的光电化学（CLE）检测策略，并用于DNA生物传感器。作者选择CIPO–H2O2–9,10-二苯蒽作为化学发光体系，在注入过氧化氢后产生约440 nm蓝光，可激发嵌入双链DNA中的光电活性材...