本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器，用于在Biacore 2000仪器上检测溶液中的碳水化合物结合蛋白（CBPs）。该传感器以固定化糖肽作为识别配体，糖肽的筛选基于此前利用蓖麻凝集素（RCA120）和人类黏附/生长调控半乳糖凝集素-1（h-Gal-1）对固相糖肽库进行的系统筛选。糖肽被固定化在经混合烷硫醇自组装单...
DNA探针的固定化是DNA生物传感器开发中的关键步骤。混合DNA/烷硫醇自组装膜常被用于将DNA探针共价偶联到传感器表面，但引入间隔基以增加特定DNA序列与表面距离的效果很少被系统评估。本研究旨在评价多种间隔基，并考察其对灵敏度、重现性等性能的影响。除常用的巯基己基（C6）间隔基外，还选择了更长的巯基十一烷基（C11）间隔基，并研究...
为理解生命活动，细胞作为最小生命单元的分析对生物学与生物技术具有重要意义。本研究提出一种基于局域表面等离子共振（LSPR）生物传感器的无标记细胞检测方法，该传感器采用核–壳结构纳米颗粒层作为激发基底。为验证其性能，作者利用小鼠胸腺分离细胞检测细胞代谢物。在固定抗体的 LSPR 传感器表面，通过抗原–抗体特异性相互作用引起的折射率变化...
本文报道了一种利用金黄色葡萄球菌 sortase A（SrtA）转肽酶活性将蛋白定点共价固定到 Biacore 传感器芯片的新方法。Biacore 是基于表面等离子共振（SPR）的实时生物传感器，可分析蛋白结合特异性、动力学和亲和力。作者先在 CM5 芯片的羧甲基葡聚糖表面通过 EDC/NHS 活化和 PDEA 硫醇偶联固定三甘氨酸...
近年来，干燥综合征（Sjögren’s syndrome, SS）患者血清中可检出针对毒蕈碱型 M3 受体（M3R）的自身抗体，但与 SS 免疫球蛋白 G（IgG）相互作用的 M3R 精确表位仍不清楚。本研究旨在鉴定与 SS IgG 结合并影响 M3R 功能的功能性表位。作者从 7 例 SS 患者（6 例原发性、1 例继发性）和 2...
表面等离子共振（SPR）技术与 Biacore 生物传感器已被广泛用于实时测量流体相中生物分子相互作用的动力学。近十年来，该检测进一步扩展到两个相对表面上锚定分子之间的反应动力学，但细胞结合动力学仍缺乏定量描述。本文报道了一种细胞动力学模型，并建立了相应的细胞结合动力学测量与数据分析流程，用于预测每个细胞的结合速率。实验以牛血清白蛋...
本文报道了一种基于胶体金的局域表面等离子共振（LSPR）生物传感器的系统制备与性能研究。玻璃基底经化学硅烷化修饰，通过混合硅烷和选择性混合优化控制金胶体密度。样品暴露于生物试剂后，利用暗场光谱监测金颗粒周围浅层介电常数变化。作者首先以生物素/链霉亲和素体系验证传感原理，并优化包被层和受体浓度，最终用于定量检测小分子合成同化激素司坦唑...
病毒RNA基因组由病毒复制酶进行复制，是病毒感染周期的核心过程。多数RNA病毒编码一个或多个自身基因组翻译蛋白，用于组装病毒复制酶复合体，该复合体包含病毒RNA、病毒蛋白以及被劫持的宿主蛋白，并嵌入细胞膜中。理解复制蛋白的多种生化活性有助于识别干预靶点，以控制病毒感染或减轻宿主细胞损伤。本文以番茄花叶小矮病毒（TBSV）复制蛋白为模...
表面等离子共振（SPR）生物传感器在将RBL-2H3肥大细胞培养于传感芯片并用抗原刺激时，可检测到共振角（AR）的显著变化，但导致这种大AR变化的分子事件尚不清楚。本研究通过遗传操纵细胞内信号分子，探讨抗原诱导的细胞内信号事件与AR变化之间的关系。过表达显性负性Syk或SLAP的RBL-2H3细胞在抗原刺激后AR仅轻微增加；过表达显...
本文报道了一种基于局域表面等离子共振（LSPR）的光学生物酶传感器的开发，该传感器采用刺激响应水凝胶–银纳米粒子复合材料构建。通过将葡萄糖氧化酶（GOx）固定于刺激响应水凝胶中，形成酶识别元件。当葡萄糖等样品溶液接触传感器表面时，水凝胶内银纳米粒子之间的平均距离增大，导致 LSPR 吸收强度下降；同时，GOx 催化葡萄糖氧化产生的过...
成功的亲和生物传感器很大程度上取决于换能系统与生物受体间的化学界面层。过去十年，金表面烷硫醇自组装单分子层（SAM）被广泛用于构建生物传感界面，含聚环氧乙烷（PEO）硫醇的混合 SAM 也常用于固定生物受体。然而，此类 SAM 的生物传感性能与长期稳定性之间的关系仍了解有限，储存条件的影响此前未见报道。本文制备混合 PEO-硫醇 S...
在生物传感器开发中，将生物试剂精确图案化到基底上是关键步骤，许多应用要求以高精度重复沉积多种试剂，实现多分析物检测。本文展示了一种压电喷墨打印系统，能够在水性和非水性试剂中创建亚毫米级（最小约150 μm）图案，并实现精确放置，用于生物传感器应用。图案的尺寸、形状和密度可通过简单调整打印参数改变。作者用该系统演示了两种用于生物传感器...
IL5和GM-CSF的受体激活是一个顺序过程，依赖于细胞因子与特异性α亚基结合并招募共同信号转导βc亚基。为阐明这些受体亚基的组装动力学，作者利用表面等离子共振（SPR）生物传感器对细胞因子-受体复合物形成进行动力学相互作用分析。通过构建C端融合V5标签的受体胞外区可溶性蛋白，建立了在SPR芯片表面共锚定α和βc亚基的检测方法。结果...
本研究利用噬菌体展示技术，从基于58个氨基酸Protein A衍生Z结构域的组合蛋白库中筛选出特异性结合人白细胞介素-2受体α亚基（IL-2Rα/CD25）的Affibody®分子。IL-2R系统参与T细胞活化与免疫应答调节，CD25在器官排斥、自身免疫病和T细胞恶性肿瘤中过表达。以Fc融合靶蛋白进行噬菌体展示筛选，共获得16个独特...
RNA环-环复合物是原核和真核生物中调控生物学功能的重要结构基序。在大肠杆菌中，ColE1质粒编码的反义RNA RNAI通过环-环相互作用识别RNAII，后者是结合质粒DNA并启动复制的RNA引物，从而调控质粒复制。质粒编码的同源二聚体蛋白Rop可与这一瞬时RNAI-RNAII kissing complex相互作用。本研究采用表面...
糖化血红蛋白（HbA1c）由葡萄糖与成人血红蛋白β链N端缬氨酸发生非酶促糖基化反应形成，其含量可反映过去2至3个月的平均血糖水平，是糖尿病长期血糖控制的重要临床指标。苯硼酸衍生物因能与二醇结构特异性结合，常被用于HbA1c检测，但其识别性能受苯硼酸衍生物与二醇比例、溶液pH及苯硼酸立体结构等因素影响。本研究采用表面等离子共振（SPR...
本研究利用表面等离子共振（SPR）光谱，考察整合素αIIbβ3（RIIb3）高效、紧密且选择性结合RGD解整合素echistatin的分子机制。将重组echistatin及其点突变体（RGD-rEch、RGDF-rEch、RGA-rEch、AGD-rEch）固定于生物传感器芯片表面，检测胶束态RIIb3与配体的结合速率、程度和稳定性...
自1998年澳大利亚商业化重组马生长激素（reGH，EquiGen-51/Bresagen）以来，该药物与天然马生长激素（eGH）仅在N端多一个甲硫氨酸（met-eGH），因此在全球赛马中被怀疑作为兴奋剂使用。reGH可影响生长、发育、生殖功能并提升运动表现，直接检测血浆中低浓度reGH仍困难。本文报道两种高通量筛查方法：表面等离子...
莱克多巴胺（ractopamine，RCT）属于β2-激动剂，已在包括美国和加拿大在内的20多个国家作为动物促生长剂获批，但在欧盟等150多个国家和地区被禁止或限制使用。随着中国因美国猪肉中检出RCT而禁止部分加工厂进口，欧洲亟需建立可靠、稳健的低浓度RCT检测方案。本研究开发了一种基于表面等离子共振（SPR）的光学生物传感器筛查方...
本文报道了一种将表面等离子共振（SPR）抑制免疫传感器（iBIA）筛选与纳米液相色谱-电喷雾电离飞行时间质谱（nano-LC ESI TOF MS）在线耦合的纳米亲和芯片接口。该接口基于可重复使用的回收芯片（RC），其表面为修饰抗体的纳米生物吸附剂，并可用SPR生物传感器表征性能。作者比较了多种水凝胶化学，标准Biacore CM5...