假结核耶尔森菌表面蛋白 invasin 以高亲和力结合多种 β1 整合素，导致 Rac1 活性失调。细菌与宿主细胞结合后，多种经 III 型分泌系统转入胞质的耶尔森菌外膜蛋白（Yops）进一步改变 Rho GTPase 活性。本研究报道该菌三种毒力因子调控 Rho GTPase RhoG。细菌结合使 RhoG 被强烈募集至附着位点，...
标准微生物水质检测方法需培养24小时以上，无法实现同日评估，增加公众暴露于粪便病原体的风险。本研究评估高容量中空纤维死端超滤与生物传感器检测联用，用于检测南加州海滩海水中肠球菌，以支持同日发布水质不佳通知。2007年5月至7月每周从4个采样点采集56份100 L超滤样品和100 mL直接采集样品。超滤后处理包括超声、微筛去除干扰颗粒...
环氧乙烷（EO）常用于心脏手术用膜式氧合器（Oxygenator）和管路（Tubing）的灭菌。EO及其衍生物氯乙醇（ECH）和乙二醇（EG）的残留可能危害患者，因此必须通过通气去除。本研究旨在估计这些器械达到安全使用限值所需的最短通气时间，并评估绿色荧光蛋白（GFP）作为生物传感器指示EO气体在灭菌室中分布和渗透的能力。2、4和8...
本文报道了一种在波导表面直接固定酶的快速方法，即利用溶菌酶介导的二氧化硅原位形成将酶封装于二氧化硅基质中。以有机磷水解酶（OPH）为模型酶，验证了溶菌酶介导硅化在酶稳定化中的应用。二氧化硅前驱体的选择直接影响硅颗粒形貌和 OPH 封装效率。将溶菌酶模板共价固定到波导表面，为二氧化硅形成提供了稳定基础，并显著增加了 OPH 封装的表面...
本研究利用表达外源肌球蛋白轻链激酶（MLCK）荧光共振能量转移（FRET）活性生物传感器的转基因小鼠，研究完整肠系膜动脉中 Ca2+/钙调蛋白（Ca2+/CaM）对 MLCK 的激活与调节。高外钾使细胞内 Ca2+（fura-2 比值或 fluo-4 荧光）和 MLCK FRET 比值均快速升至峰值后先快后慢下降；张力先出现相性峰值...
本文报道了一种基于适配体诱导荧光磁性纳米二氧化硅三明治复合物解离的腺苷一磷酸（AMP）生物传感器。传统荧光染料标记DNA探针存在信号放大有限和光漂白问题，而荧光二氧化硅纳米颗粒可包埋大量荧光团，具有强荧光、高光和生物相容表面。作者合成氨基修饰荧光二氧化硅纳米颗粒（FNP，70 nm）和磁性二氧化硅微球（MSMP，200 nm），以戊...
本文报道了一种基于组合锥形光纤生物传感器（CTFOB）浸没探针的高特异、高灵敏人白细胞介素-6（IL-6）检测方法。探针由多模石英光纤经酸蚀制成组合锥形结构，利用倏逝波诱导荧光进行信号读出。抗人 IL-6 捕获抗体通过 APTS 氨基化和 Sulfo-SMCC 交联固定于探针表面；样品中的 IL-6 与表面捕获抗体结合后，再加入 A...
传感元件与小群体细胞的整合是细胞培养与分析微型化的关键步骤。本文报道了一种用于局部检测受刺激巨噬细胞分泌过氧化氢（H2O2）的光学酶基生物传感器。通过光刻图案化含辣根过氧化物酶（HRP）的聚乙二醇（PEG）水凝胶微结构，在玻璃表面构建传感结构。包埋酶的水凝胶微图案不支持蛋白或细胞沉积，并能引导巨噬细胞附着于传感元件旁。Amplex ...
本文报道了一种用于牛奶中黄曲霉毒素M1（AFM1）高灵敏检测的新型生物传感器。该传感器基于表面等离子体增强荧光光谱（SPFS），并通过激发长程表面等离子体（LRSP）进一步提高灵敏度。在SPFS中，荧光标记分子与传感器表面的结合由表面等离子体探测，发射的荧光被检测；共振激发表面等离子体时产生的电磁场增强可直接提高荧光信号。针对AFM...
本文提出并实验验证了一种基于纳米流体通道稳态扩散的蛋白复合物形成生物传感方法。利用纳米限域空间降低生物分子有效扩散系数的特性，该方法可监测两种蛋白之间的结合亲和力。作者建立了纳米缝中蛋白浓度分布的理论模型，表明由两个结合生物分子形成的复合物在纳米通道中受驱动时，其稳态荧光扩散轮廓比单个蛋白更宽。实验采用荧光标记链霉亲和素（Alexa...
丙型肝炎病毒（HCV）NS3/4A 蛋白酶在病毒复制中起关键作用。本研究报道了一种用于在单个活哺乳动物细胞中监测该酶活性的荧光共振能量转移（FRET）探针。该探针由增强青色荧光蛋白（ECFP）与 citrine（增强黄色荧光蛋白变体）融合而成，二者之间的连接肽中嵌入 HCV NS3/4A 蛋白酶切割位点。在哺乳动物细胞中表达该生物传...
富含鸟嘌呤的核酸序列常存在于端粒、基因启动子等生物重要区域，且多与互补链共存，因此发展灵敏的生物传感器以区分 G-四链体与双链结构并测定四链体相对双链的竞争能力备受关注。本研究采用荧光光谱和能量转移荧光光谱，考察了两种三苯甲烷染料甲基绿（MG）和结晶紫（CV）与 G-四链体、双链 DNA 或单链 DNA 的相互作用。结果表明，利用 ...
基因编码荧光蛋白可作为监测细胞过程的理想报告分子，因为它们可通过与目标蛋白融合而靶向任意亚细胞区域。本文报道了一种pH敏感荧光蛋白E1GFP，其适合以高时空分辨率实时监测动态细胞器内的pH变化。E1GFP是一种基于发射的比率型pH指示剂，pK接近6.0。作者将其应用于内体-溶酶体途径中pH变化的测量。通过将E1GFP与具有细胞穿透能...
来自 Comamonas testosteroni 的 3β-羟基类固醇脱氢酶/羰基还原酶是环境中类固醇降解的关键酶，其编码基因 hsdA 在无类固醇时仅低水平表达，存在类固醇底物时可被诱导数倍。前期研究已阐明 hsdA 的调控涉及多种激活因子与抑制因子。本研究将 hsdA 基因替换为绿色荧光蛋白（GFP）基因，并将其插入 hsdA...
本研究评估了固定化蛋白磷酸酶（PP）生物传感器检测微囊藻毒素和岩藻毒素的可行性。将PP固定化于CNBr活化琼脂糖微球，并置于Millipore微滤板孔中，在优化条件下以荧光底物MUP实时监测酶活性。固定化PP-2A被岩藻毒素（OA）和微囊藻毒素LR（MC-LR）抑制，IC50分别为12.5和11 nM；固定化重组PP-1对MC-LR...
蘸笔纳米光刻（DPN）是制备多种材料纳米图案的常用技术。F0F1-ATPase 是一种纳米级旋转分子马达，可用作生物传感器或微纳系统中的理想马达器件。本文利用 DPN 在金表面制备位于染色质体（chromatophore）内的 F0F1-ATPase 纳米阵列。所制备图案的特征尺寸平均为 130 nm，从数学上估计每个点内不超过 1...
本研究开发了一种以绿色荧光蛋白（GFP）作为直接生物传感器检测突变的新方法，用于评估可疑致突变物的致突变效力。作者以苯并[a]芘高反应性亲电代谢物(±)-7β,8α-二羟基-9α,10α-环氧-7,8,9,10-四氢苯并[a]芘（BPDE）为模型致突变物，将不含质粒骨架的目标AcGFP1基因片段暴露于10–500 μM BPDE，形...
本文报道了一种由单壁碳纳米管（SWNT）与寡核苷酸自组装形成的新型荧光猝灭复合物，并证明其可在均相溶液中一步识别和检测特定DNA序列。该复合物的关键组分是发夹结构荧光寡核苷酸，使SWNT同时充当寡核苷酸的“纳米支架”和荧光团的“纳米淬灭剂”。因此，该碳纳米管复合物代表一类与有机淬灭剂显著不同的通用荧光淬灭剂，有望在分子工程和生物传感...
为快速监测娱乐水体的粪便污染，本研究建立了中空纤维超滤浓缩与生物传感器检测联用的肠球菌快速检测方法。在佛罗里达坦帕湾上湾采集12份100 L海水样品，现场采用死端中空纤维超滤浓缩，随后对初始浓缩液进行超声处理、微米级筛分以去除干扰颗粒，并离心二次浓缩；同时采集瞬时水样。采用EPA方法1600测定各阶段肠球菌浓度，用于计算回收率和浓缩...
过去二十年，疾病已成为野生动物管理中日益重要的问题。充分的监测是疾病预防与控制的基础，因此野生动物管理对诊断方法的需求不断增加。本研究旨在评估一种经改造用于快速检测龟血浆中特异性抗体的便携式生物传感器，这些抗体反映龟曾暴露于阿加西丝支原体（Mycoplasma agassizii），该菌是龟上呼吸道疾病的病原。对储存血浆样本进行了两...