本研究旨在将生物传感器技术应用于动物来源复杂基质中急性期蛋白（APP）浓度的检测。作者首次利用无标记表面声波（SAW）生物传感器系统 sam®5，从未经纯化的屠宰猪肉汁中检测急性期蛋白结合珠蛋白（haptoglobin, Hp）。该系统采用固定有猪 Hp 特异性抗体的传感器芯片捕获目标蛋白，并通过测量纵向 Love 波的质量相关相移...
用于疾病诊断和病理状况监测的分析常依赖血液样本，部分原因是采血相对容易。然而，全血中存在大量干扰物质，通常需要先分离血浆或血清，增加了步骤、时间和成本。本文开展了一项可行性研究，证明新鲜或冷冻全血可直接用于基于ELISA的方法检测可溶性生物标志物。以可溶性CD25（sCD25）为代表，作者比较了健康志愿者和阿尔茨海默病患者血浆与全血...
本研究将检测牛疱疹病毒1（BoHV-1）抗体的间接ELISA方法转移至商用低成本一次性Vantix电位型电化学免疫传感器平台。该传感器由工作电极和参比电极组成，表面涂覆聚吡咯导电聚合物，工作电极点涂BoHV-1全病毒抗原；样品中的BoHV-1抗体被捕获后，用兔抗牛HRP二抗识别，并在TMB底物中通过HRP催化产生可测量的电位变化。对...
叶酸结合蛋白（FBP）约40年前在牛乳中被发现。牛源FBP属于多种叶酸结合蛋白家族，在乳中为可溶性乳清蛋白，能从血浆中富集叶酸。牛FBP的氨基酸序列和结合特性已得到充分表征。由于亲和力和结合动力学对将牛FBP用作分析工具至关重要，其与不同叶酸形式的相互作用被深入研究。牛FBP鉴定后不久，竞争性蛋白结合法被引入用于测定血清和血液叶酸浓...
本文报道一种适用于多种聚合物基质的快速高灵敏 ELISA 免疫检测方案。该方法首先用乙醇清洗微孔板，再以 1% KOH 和 O2 等离子体温和活化聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯、醋酸纤维素及 Zeonex 等表面，引入羟基/羰基；随后用 3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）在真空干燥器中胺化，形成氨基自组装层。利用 EDC/...
炭疽杆菌（Bacillus anthracis）分泌的保护抗原（protective antigen, PA）是重要的毒力因子，也被选作细菌感染检测的生物标志物。本研究采用系统进化指数富集（SELEX）技术，从随机单链 DNA 文库中筛选能紧密结合 PA63 的寡核苷酸适配体。经过 8 轮体外筛选，获得 4 个含 30 个碱基序列的...
新蝶呤是细胞免疫的有价值生物标志物，与病毒感染、细菌感染、自身免疫、心血管、神经退行性和恶性疾病等多种病理状态相关。为快速多生物标志物诊断制备特异性抗新蝶呤抗体，作者合成了新型半抗原衍生物并将其偶联到载体蛋白上。经充分表征的偶联物用于免疫BALB/c小鼠和兔。所制备的单克隆抗体在直接和间接酶联免疫吸附试验（ELISA）格式中分别达到...
α-突触核蛋白在多种分泌细胞中发挥作用。本研究检测其在胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒中的定位，并表征其对葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响。采用免疫组化与荧光磺脲类探针检测α-突触核蛋白定位；免疫沉淀联合Western blot分析其与KATP通道的相互作用；ELISA检测上调或下调α-突触核蛋白表达对INS1细胞或小鼠胰岛胰岛素分泌的影响；共聚...
本研究比较了表面等离子共振（SPR）生物传感器、酶联免疫吸附测定（ELISA）和超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）三种方法在葡萄糖-牛血清白蛋白（BSA）模型体系中检测Nε-(羧甲基)赖氨酸（CML）的能力，并考察R-生育酚、阿魏酸、芦丁、硫胺、硫胺单磷酸和硫胺焦磷酸等候选抗糖化剂对CML形成的抑制作用。结果显示，CM...
三乙酰基三过氧化氢（TATP）是一种简易爆炸物，因合成成本低且难以直接检测而构成安全威胁。高选择性抗体可为检测提供必要特异性。本研究以丙酮、过氧化氢和7-氧辛酸为原料设计并合成了与TATP结构高度相似的羧基化半抗原，并通过NMR确认其结构。作者测定了TATP·甲醇（1:1）溶剂合物及TATP衍生物的单晶X射线结构，发现两者均具有D3...
氯霉素（CAP）因对食品动物产生不良健康效应，已在欧盟禁止用于食品生产动物。欧洲委员会联合研究中心参考物质与测量研究所（IRMM）正在开发猪肉中氯霉素认证参考物质（CRM）ERM-BB130，用于分析方法的验证和性能确认。该材料拟以液相色谱-串联质谱（LC–MS/MS）和气相色谱-质谱（GC–MS）方法认证，目标氯霉素水平约为最低要...
本研究采用迭代亲和筛选（biopanning）策略，从 Tomlinson I+J 天然噬菌体展示库中筛选出多个可特异性识别并结合趋化因子单核因子诱导的干扰素γ蛋白（MIG/CXCL9）的单链 Fv（scFv）抗体片段克隆。MIG 是移植排斥过程中的重要趋化因子蛋白。作者通过 ELISA 亲和表征发现，筛选所得 scFv 在生物筛选...
病原识别与防御反应快速启动对宿主昆虫存活至关重要。在烟草天蛾（Manduca sexta）中，血淋巴蛋白酶14前体（proHP14）感知非己信号，触发分支丝氨酸蛋白酶级联，最终激活前酚氧化酶并导致入侵微生物周围黑色素形成。为解析 HP14 各结构域功能，作者表达了一系列 HP14 结构域及 N 端截短突变体，包括 LDL1–5、Su...
本研究开发用于诊断GB病毒C（GBV-C）感染的合成嵌合多抗原肽（MAPs）。为提高线性肽序列的抗原性，作者合成了包含GBV-C包膜蛋白E2及非结构蛋白NS4、NS5表位的四聚体分支MAPs，并通过ELISA比较其与单体线性肽被特异性抗体识别的效率。同时，利用商业表面等离子共振（SPR）生物传感器检测人血清中的抗GBV-C抗体。结果...
生物芯片和生物传感器制备中，优化生物分子在表面的固定是关键。本文报道一种简便方法，在具有抗生物污损性质的两亲聚合物涂覆塑料表面选择性固定生物分子。作者通过自由基聚合合成两类随机共聚物，分别由锚定基团、作为非特异生物分子排斥剂的聚乙二醇（PEG）组分以及用于偶联生物分子的功能基团组成。十二烷基和苄基型共聚物因含多个PEG基团而高度水溶...
酶联免疫吸附测定（ELISA）广泛用于医学诊断、环境分析和生化研究。为缩短细胞因子ELISA分析时间并降低试剂消耗，作者设计并制备了一种聚合物微流控生物芯片，采用多项新技术：基于聚苯胺的表面修饰实现超疏水毛细管阀，以及氧等离子体-聚乙烯亚胺-酪氨酸酶-蛋白A修饰实现高灵敏度蛋白检测。利用超疏水毛细管阀实现正确的流序控制；实验测定各阀...
高效抗体固定是微阵列和微流控生物芯片开展酶联免疫吸附试验（ELISA）等高性能免疫检测的关键。本研究开发了一种基于生物素-聚(L-赖氨酸)-g-聚乙二醇（biotin-PLL-g-PEG）和蛋白A的抗体固定技术，用于聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）微通道表面。首先用氧等离子体活化PMMA，再接枝聚丙烯酸（PAA）引入羧基；biotin-...
本文报道了一种用于检测金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）的流动注射电容生物传感器。SEB 从金黄色葡萄球菌粗培养滤液中经三步层析纯化：前两步为离子交换层析，最后一步为凝胶过滤层析，各步回收率分别为88%、74%和12%。采用高碘酸盐法制备辣根过氧化物酶标记抗SEB抗体，并用于夹心酶联免疫吸附试验（ELISA），测定纯化过程中不同样品中...
本研究制备了一种基于酶联免疫吸附试验（ELISA）技术的条带型生物传感器，用于检测大肠杆菌O157:H7。采用两种特异性抗体形成夹心结合复合物：捕获抗体（单克隆抗体）固定于信号产生垫，辣根过氧化物酶（HRP）标记的多克隆抗体作为检测抗体。试条由四种功能膜组成：经聚乙烯醇预处理的玻璃纤维膜样品加样垫、玻璃膜结合物释放垫、硝酸纤维素膜信...
自1998年澳大利亚商业化重组马生长激素（reGH，EquiGen-51/Bresagen）以来，该药物与天然马生长激素（eGH）仅在N端多一个甲硫氨酸（met-eGH），因此在全球赛马中被怀疑作为兴奋剂使用。reGH可影响生长、发育、生殖功能并提升运动表现，直接检测血浆中低浓度reGH仍困难。本文报道两种高通量筛查方法：表面等离子...