本研究首次将表面等离子共振（SPR）技术用于炭疽杆菌芽孢（Bacillus anthracis spores）的快速、灵敏、无标记检测。作者采用Biacore 3000 SPR生物传感器和抗炭疽芽孢单克隆抗体mAb 8G3，通过减法抑制法（subtractive inhibition assay）检测完整芽孢。先将mAb 8G3与不...
本文系统研究了纳米图案化聚合物薄膜上蛋白质-表面相互作用的调控机制。作者利用聚苯乙烯-嵌段-聚甲基丙烯酸甲酯（PS-b-PMMA）嵌段共聚物自组装制备了特征尺寸从 13 到约 200 nm、界面长度密度从 8 到 84 µm/µm² 的纳米图案表面，并通过原子力显微镜（AFM）表征其形貌与化学域分布。随后，在磷酸盐缓冲液（PBS）中...
人源IgG4的Fc片段可与另一IgG分子的Fc片段相互作用，该相互作用是测定IgG4类风湿因子水平时的干扰因素。作者此前证明IgG4半分子可交换形成双特异性抗体，推测两种现象相关，因此研究IgG4 Fc-Fc相互作用的理化特性。尺寸排阻色谱显示IgG4在液相中>99%为单体，提示若存在液相Fc-Fc相互作用也应短暂。但125I标记I...
表面等离子共振（SPR）生物传感器技术已成功用于蛋白质、药物、DNA 和微生物等多种分析物的检测。基于 SPR 的免疫传感器将特异性抗原-抗体反应与光学换能相结合，具有灵敏、特异、快速和无标记检测等优点，已成为细菌定量检测的有前景工具。本文综述了 SPR 免疫检测法用于细菌检测开发中的关键问题，重点讨论仪器系统、表面功能化、液体处理...
促生长剂在动物饲养中被非法使用，现有基于液相色谱-串联质谱和气相色谱-质谱的残留检测难以覆盖不断出现的新化合物及低剂量混合给药。本文提出以间接生物学证据作为筛查工具，通过检测血浆性激素结合球蛋白（SHBG）结合能力变化识别促生长剂处理动物。SHBG是结合并调控循环性激素水平的糖蛋白。作者建立基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器配...
人源 HIV-1 单克隆抗体 2F5 识别核心序列 ELDKWA，4E10 识别核心序列 NWFNIT，二者是 HIV-1 疫苗免疫原设计的有前景模型。然而，这些识别域单独免疫难以诱导广谱中和抗体，且相关抗体可能具有膜结合特性，提示高效免疫原可能需要膜组分等额外识别基序。本研究采用源自 gp41 天然序列、同时包含 2F5 和 4E...
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的免疫测定方法，用于在人血清中直接、无预处理地检测人生长激素（hGH）。该传感器采用结合抑制免疫分析格式，通过优化抗体浓度、检测缓冲液和再生液，降低血清基质成分在传感表面的非特异性结合。方法最低检测限为6 ng/mL，工作范围覆盖生理浓度范围。批内和批间相对标准偏差均小于5%，不同传感器芯片...
为降低橄榄油中掺入榛果油造成的经济损失和过敏风险，作者开发了一种基于高特异性抗榛果单克隆抗体的快速直接生物传感器免疫分析方法。该方法利用 BIACORE 3000 表面等离子共振平台，将单克隆抗体 MAb 50-5H9 固定于 CM5 芯片测量通道，并在参考通道固定抗花生单克隆抗体 MAb 51-12D2 以扣除非特异结合。橄榄油样...
适配体是体外筛选的短单链DNA或RNA序列，对靶分子具有高亲和力和特异性。本文证明，针对真核起始因子4A（eIF4A）筛选的RNA适配体可作为高效生物传感器。将该适配体固定于树脂后，可从粗细胞裂解液中通过亲和pull-down纯化eIF4A；32P标记适配体可通过点印迹检测约300 ng eIF4A。进一步，利用固定化适配体传感芯片...
戈登链球菌（Streptococcus gordonii）与牙面唾液膜相互作用，在牙菌斑生物膜形成中起重要作用。已有报道显示，SspA/SspB 的 Ssp 类似肽 A11K（第11位丙氨酸替换为赖氨酸，序列 DYQAKLAAYQAEL）可增强与唾液凝集素（gp-340/DMBT1）肽 SRCRP2 的结合。为明确赖氨酸在该结合中的...
本研究采用表面等离子共振（SPR）生物传感器技术，系统考察六种高亲和力胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP-1至IGFBP-6）与纤连蛋白（FN）细胞结合域（CBD）的相互作用。作者以纤连蛋白第9和第10型III结构域（9–10FNIII）的生物素化衍生物作为固定化配体，将其通过链霉亲和素（SA）固定于SPR芯片表面，再让不同浓度I...
本研究采用细胞表面展示策略，将金结合多肽（GBP）融合蛋白展示于大肠杆菌表面，从而实现细胞在金表面的固定。编码GBP的DNA与截短fadL基因融合，由tac启动子表达；为展示Streptomyces avidinii的核心链霉亲和素（cSA），将cSA基因与截短oprF基因融合。在大肠杆菌表面同时展示FadL–GBP和OprF–cS...
复杂基质中低浓度分析物的快速、灵敏、准确检测是关键挑战。血浆、尿液、粪便和环境样品中的干扰会降低生物传感器灵敏度与特异性。作者开发了基于抗体包被超顺磁纳米珠（免疫磁珠，IMBs）的方法，用于从复杂基质中快速纯化、浓缩并检测目标分析物。以金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）为例，将IMBs用作检测放大器时，表面等离子共振（SPR）信号显著...
胎儿生长受限（FGR）是胎儿无法达到其遗传决定体型的常见疾病，羊水中胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）浓度升高与 FGR 相关。IGFBP-1 磷酸化可调节胰岛素样生长因子-I（IGF-I）的生物利用度。本研究设计了一种新策略，用于建立 IGF-I 亲和力与 IGFBP-1 磷酸化异构体磷酸化状态特征之间的联系。利用自由...
本研究从担子菌蘑菇 Pleurotus cornucopiae（Tamogitake）中发现两种新型生物素结合蛋白，命名为 tamavidin 1 和 tamavidin 2。它们是首次在鸟类和细菌以外生物中发现的类卵白蛋白蛋白。序列分析显示，tamavidin 1 和 tamavidin 2 与卵白蛋白（avidin）的氨基酸同一...
本文描述了一种通过在同一亲和生物传感器检测面上使用一组对共同分析物具有不同亲和力的配体，以扩展分析物定量动态范围的概念。三种合成、生物素化多肽能够以不同亲和力（10^-9 M ≤ Kd ≤ 10^-7 M）结合一种模型蛋白分析物，并以微阵列形式固定在覆盖含聚乙二醇烷硫醇自组装单层的金片上。通过压电点样实现了包含单肽点以及多肽混合点的...
法布里病酶增强治疗（EET）使用氨基糖，认为氨基糖可作为野生型和突变型人α-半乳糖苷酶A（GLA）的药理学伴侣，但氨基糖与酶之间的分子相互作用机制尚未明确。作者检测了多种氨基糖，发现半乳糖定亚硫酸盐（GBS）在体外抑制 GLA，并在培养的法布里成纤维细胞中增加酶活性，作用类似 1-脱氧半乳糖基诺吉米星（DGJ）。随后通过等温滴定量热...
胎儿和新生儿同种免疫性血小板减少症（FNAIT）多由母体抗人血小板抗原（HPA）-1a同种抗体引起。目前血清学诊断主要依赖单克隆抗体抗原捕获法（如MAIPA），但已有证据提示该方法可能漏检部分HPA-1a抗体。本研究采用表面等离子共振（SPR）技术，将免疫亲和纯化的糖蛋白IIb/IIIa（GPIIb/IIIa）HPA-1a/1b异构...
本文报道了一种基于银镜反应增强表面等离子共振（SPR）生物传感器灵敏度的方法。作者先在金（Au）膜表面构建1,6-己二硫醇（HDT）自组装单层，再利用银镜反应在Au膜上沉积一层薄银（Ag）膜，形成Ag/Au复合膜。随后用3-巯基丙酸（MPA）自组装层连接Ag膜与生物识别元件，并通过EDC/NHS活化羧基固定兔抗人IgG抗体。该传感器...
唾液皮质醇检测对疾病诊断和人体压力监测具有重要意义。目前主要采用放射免疫分析（RIA），但该方法昂贵、劳动密集、使用放射性同位素且结果延迟。本文报道一种基于纳米连接子化学与表面等离子共振（SPR）检测的微流控免疫生物传感器，用于快速、超灵敏检测唾液皮质醇。作者理性设计了皮质醇-连接子偶联物，并将其作为包被抗原共价固定于SPR传感表面...