为研究胆固醇组成对凝血因子VIII（FVIII）和膜联蛋白V（AV）与膜结合的影响，作者构建了不同磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰丝氨酸（PS）和胆固醇组成的磷脂双分子层脂质体膜，并采用表面等离子共振（SPR）生物传感器系统测定其结合平衡常数与速率常数。结果表明，PS在AV结合中起主导作用，AV结合水平与脂质体中PS摩尔比例基本成正比。F...
本文报道了一种基于达尔文生存选择的 Affibody 分子亲和力成熟策略。作者利用 β-内酰胺酶蛋白片段互补分析（PCA）系统，在大肠杆菌周质中通过目标蛋白与库成员结合驱动 β-内酰胺酶活性重建，使具有 TNFα 结合能力的克隆获得在含氨苄青霉素选择培养基中的生长优势。研究首先考察了 IPTG 诱导水平、相互作用亲和力和选择压力对系...
本文报道了金/氧化锌（Au/ZnO）纳米复合薄膜用于增强表面等离子共振（SPR）检测肿瘤标志物的性能。以乳腺癌肿瘤标志物糖类抗原15-3（CA15-3）为模型分析物，在乳腺癌患者胸水样品中分析不同浓度（0.0125–160 U/mL）的强度响应，评估基于 Au/ZnO 薄膜的 SPR 生物传感器检测能力。结果显示，CA15-3 的线...
本文利用发夹DNA探针在DNA连接过程中的自结构变化，结合自制高分辨率表面等离子共振（SPR）仪器，建立了一种灵敏、无标记且简便的大肠杆菌DNA连接酶（E. coli DNA ligase）活性检测方法。该方法可实时监测DNA连接过程，并考察单碱基突变对连接过程的影响。实验表明，当发夹探针与含5′-磷酸和3′-羟基的两段靶DNA杂交...
表面等离子共振（SPR）是生物医学传感技术中有前景的工具。本研究建立了一种基于SPR的免疫传感器，用于登革病毒感染的无标记、实时血清学诊断，以登革病毒抗原作为传感元件。登革病毒抗原与牛血清白蛋白（BSA）偶联后，通过11-巯基十一烷酸（11-MUA）活化自组装单分子层（SAM）以酰胺键共价固定于金传感器芯片上，并用原子力显微镜（AF...
整合素是参与血管生成并在多种肿瘤中高表达的异二聚体细胞表面受体，其RGD识别位点是设计αvβ3抑制剂的重要结构基础。本研究采用表面等离子共振（SPR）生物传感器技术和分子对接模拟，系统考察多种环肽抑制剂与整合素αvβ3的结合特征。实验使用Biacore X100仪器和CM5芯片，通过NHS/EDC活化与氨基偶联将整合素αvβ3固定于...
作者近期报道金黄色葡萄球菌免疫逃逸分子Sbi与补体C3的相互作用，主要由C3d(g)结合Sbi第IV结构域（Sbi-IV）介导。基于这些研究，作者通过定点突变分析C3d与Sbi-IV的结合界面，并重新审视C3d上补体受体2（CR2）结合位点的争议。此前发现Sbi III-IV片段结合C3dg会抑制C3dg与CR2结合；而C3d与Ef...
报道了一种基于水凝胶光波导光谱（HOWS）测量结合诱导折射率变化的新型无标记生物传感器。该传感器采用表面等离子共振（SPR）光学装置实现：将羧化聚(N-异丙基丙烯酰胺)（PNIPAAm）水凝胶薄膜附着于金属表面，并通过胺偶联化学修饰蛋白捕获分子。微米级厚度的溶胀水凝胶同时作为结合基质和光学波导。与基于硫醇自组装单分子层（SAM）的常...
周质结合蛋白超家族成员参与细菌细胞膜对配体的选择性转运。超嗜热真细菌 Thermotoga maritima 编码一种高度稳定且特异性的周质精氨酸结合蛋白 TM0593。去除信号肽后，TM0593 在大肠杆菌中过表达，并经热沉淀和亲和层析纯化。该蛋白单体分子量约 27.7 kDa，在强变性条件下仍可形成同二聚体和同三聚体，估计转变温...
光学生物传感器技术仍是无标记、实时生物分子相互作用分析的首选方法。但若要提升生物传感器文献质量，教育应处于基础地位。在2008年发表的1413篇相关论文中，不到30%能达到高中化学课程对实验设计、数据分析与结果呈现的基本要求。为以例教学，本文重点介绍10篇能够正确实施该技术的代表性论文，随后对2008年所有论文按A至F等级逐一评分，...
食品安全是全球健康目标，食源性疾病对公共健康构成重大威胁，因此食品中微生物病原体的检测是预防与识别健康和安全问题的重要手段。传统标准细菌检测方法，如培养与菌落计数、免疫学方法和聚合酶链反应（PCR）方法，往往需要数小时甚至数天才能给出结果，难以满足快速检测需求。近年来，研究者关注快速检测方法的发展，生物传感器虽显示出潜力，但在成为真...
新生儿 Fc 受体（FcRn）通过 pH 依赖结合挽救 IgG 和白蛋白免于降解，维持其血清水平。无白蛋白血症是一种罕见常染色体隐性遗传病，患者循环中白蛋白缺失或极低，相关白蛋白变体可能因 FcRn 结合改变而影响半衰期、分布和转运能力。本研究建立简便的克隆、表达和纯化策略，获得重组谷胱甘肽 S-转移酶（GST）标记人血清白蛋白（H...
表面等离子共振（SPR）技术与生物传感器表面已成为研究核酸相互作用且无需标记的常用工具。该方法可同时对生物分子相互作用以及小分子-生物大分子结合进行动力学和平衡表征，实时监测分子相互作用，并对强结合但光谱信号或反应热较小的体系具有显著优势。本文提供了使用 SPR-生物传感器方法进行核酸相互作用分析的详细实用指南，介绍了 SPR 技术...
金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）是引起食物中毒的重要外毒素。本研究通过噬菌体展示肽库筛选SEB结合肽，并用等温滴定量热法（ITC）测定其结合热力学参数。在5个候选肽中，3个与SEB具有亲和力，其中peptide3亲和力最高，结合常数约10^5 M^-1。ITC结果表明，肽与SEB的结合主要由熵驱动，疏水相互作用占主导。圆二色光谱（C...
维生素B6（B6）可抑制脂多糖（LPS）刺激的小鼠巨噬细胞RAW264.7中环氧合酶-2（COX-2）表达，其中吡哆醛（PL）的作用强于吡哆胺（PM）、吡哆醇（PN）和吡哆醛-5'-磷酸（PLP），但PL作用最强的机制尚不清楚。本研究比较PL、PM、PN和PLP在RAW264.7细胞中的摄取及细胞表面相互作用。采用实时荧光定量PCR...
本研究利用Autodisplay技术将蛋白A的Z-domain作为重组融合蛋白表达于大肠杆菌（Escherichia coli）外膜上，并将自展示Z-domain的大肠杆菌外膜层作为高灵敏度分子识别层构建SPR生物传感器。作者通过不同疏水性的受控表面验证了外膜层的形成，并利用辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体作为模型分析物评估Z-do...
单径向免疫扩散（SRID）是季节性流感疫苗效价检测中定量血凝素（HA）的主要方法，但操作繁琐且灵敏度、精密度有限。本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）生物传感器技术定量流感病毒的新方法。该方法采用抑制法格式，将 A/H1N1、A/H3N2 和 B 型重组 HA 蛋白分别固定于传感器芯片的不同流道；将待测病毒与固定浓度的抗流感血...
本文报道了一种用于检测人免疫球蛋白G（human IgG）的新型表面等离子共振（SPR）生物传感器。该传感器通过气相沉积法在 SPR 金膜表面构建三层二氧化钛（TiO2）溶胶-凝胶膜：胶体金纳米颗粒（AuNP）被固定在第二层 TiO2 膜中，与兔抗人 IgG 偶联的 AuNP 则包埋于第三层 TiO2 膜中。结果表明，第二层 TiO...
靛红（isatin，吲哚-2,3-二酮）是一种内源性吲哚，在脑及其他哺乳动物组织和体液中呈不连续分布，应激和焦虑时其水平升高。靛红及其类似物具有多种药理活性，但具体生物学靶标仍不清楚。作者将 Triton X-100 裂解的大鼠和小鼠全脑匀浆可溶及颗粒组分在 5-氨基己酰-靛红-Sepharose 亲和柱上分离，并经蛋白组学分析，分...
本研究开发用于诊断GB病毒C（GBV-C）感染的合成嵌合多抗原肽（MAPs）。为提高线性肽序列的抗原性，作者合成了包含GBV-C包膜蛋白E2及非结构蛋白NS4、NS5表位的四聚体分支MAPs，并通过ELISA比较其与单体线性肽被特异性抗体识别的效率。同时，利用商业表面等离子共振（SPR）生物传感器检测人血清中的抗GBV-C抗体。结果...