Identification and evaluation of apoptotic compounds from Garcinia oligantha.
从 Garcinia oligantha 茎的丙酮提取物中分离得到四个新化合物 oliganthins A-D（1-4）和一个已知笼状呋喃酮 gaudichaudione H（5），并通过质谱和核磁共振等光谱证据阐明其结构。五个化合物均利用基因工程 HeLa-C3 细胞评估凋亡诱导活性；该细胞表达可检测 caspase-3 激活的荧...
Ligand-directed acyl imidazole chemistry for labeling of membrane-bound proteins on live cells.
基于化学的活细胞蛋白标记对于理解天然蛋白功能及生物制药应用具有重要意义。本文报道了一种用于体外和活细胞条件下内源性膜结合蛋白标记的新方法。作者设计了中等反应性的烷氧基酰基咪唑（AI）试剂，在配体结合亲和力辅助下实现配体导向酰基咪唑（LDAI）化学，从而选择性修饰天然蛋白，如二氢叶酸还原酶（DHFR）和叶酸受体（FR）；这些蛋白此前难...
Biosensor for on-line fluorescent detection of trifluoroperazine based on genetically modified calmodulin.
本文报道了一种基于荧光标记人钙调蛋白（CaM）突变体hCaM M124C-mBBr的在线荧光生物传感器，用于检测人尿中吩噻嗪类药物三氟哌嗪（TFP）。该突变体通过戊二醛共价固定于经3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）功能化的控制孔玻璃（CPG）珠上，并装填于连续流微池中；微池连接分叉光纤与荧光分光光度计，实现自动化在线监测。研究优...
Signal enhancement of a micro-arrayed polydiacetylene (PDA) biosensor using gold nanoparticles.
聚二炔（PDA）脂质体具有对外界刺激产生颜色变化和荧光发射的独特性质，已被广泛研究作为生物传感器信号换能器。本文报道了一种基于 PDA 脂质体的抗体生物传感器，用于检测人免疫球蛋白 E（hIgE）。目标 hIgE 与固定在 PDA 脂质体上的 hIgE 单克隆抗体结合后，荧光信号随目标蛋白浓度略有增加，初级响应可检测至 10 ng/...
Molecular beacon-based fluorescence biosensor for the detection of gene fragment and PCR amplification products related to chronic myelogenous leukemia.
本文建立了一种基于分子信标的荧光生物传感器方法，用于检测慢性髓系白血病（CML）相关基因片段及 PCR 扩增产物。作者设计了一种分子信标（MB），其环区序列依据 CML b3a2 型 BCR/ABL 融合基因 DNA 序列设计，5′端标记荧光基团四甲基罗丹明（TAMRA），3′端标记猝灭剂 DABCYL。未杂交时，MB 呈发夹结构，...
Analysis of integrated optofluidic lab-on-a-chip fluorescence biosensor based on transmittance of light through a fluidic gap.
灵敏度分析是片上实验室系统设计的重要方面。本文针对集成光流控荧光生物传感器，提出用数学公式计算流体间隙的最佳宽度，使传感器灵敏度达到最大，该最佳宽度对应特定模式光斑尺寸。研究还表明，传感器灵敏度受光耦合效率影响，而耦合效率随流体间隙宽度、流体折射率以及高阶模的变化而变化。论文采用有效折射率法设计银离子扩散玻璃集成通道波导，并在扩散区...
Multifunctional encoded self-assembling protein nanofibrils as platform for high-throughput and multiplexed detection of biomolecules.
本文报道了一种由天然 β-淀粉样蛋白（Aβ）肽与生物素化 Aβ 肽共组装形成的一维纳米纤维阵列，用于生物分子传感。生物素基团使多种生物分子探针可连接至纳米纤维，从而将蛋白自组装体转化为微型生物传感器。作者将 DNA 探针固定于纤维上，用于检测互补 DNA 序列；所构建的“DNA-纳米阵列”在 10 μL 样品中达到亚阿摩尔级检出限（...
Rational design of fluorescent biosensor for cyclic di-GMP.
环二鸟苷酸（c-di-GMP）是细菌中调控毒力表达、生物膜形成等过程的重要第二信使，其胞内水平由 GGDEF 结构域二鸟苷酸环化酶（DGC）合成和 EAL/HD-GYP 结构域磷酸二酯酶（PDE）降解共同控制。目前体外检测 DGC/PDE 酶活多依赖放射性标记 c-di-GMP 或 HPLC，操作复杂且通量低。本文基于铜绿假单胞菌 ...
A graphene oxide-based AIE biosensor with high selectivity toward bovine serum albumin.
本文发现氧化石墨烯（GO）可有效增强聚集诱导发光（AIE）生物传感器的选择性，并提出一种基于 GO 与 AIE 分子的新方法，用于高灵敏、高选择地检测牛血清白蛋白（BSA）。TPE-SO3Na 与 GO 通过 π-π 堆积形成 GO–TPE–SO3Na 复合物，GO 对 TPE-SO3Na 的荧光猝灭作用使背景信号降低。加入 BSA...
Imaging cytosolic NADH-NAD(+) redox state with a genetically encoded fluorescent biosensor.
NADH 是电子传递中的关键代谢辅因子，但在活细胞胞质中对其进行敏感、特异检测一直困难。作者将环化置换绿色荧光蛋白 T-Sapphire 与细菌 NADH 结合蛋白 Rex 结合，构建了胞质 NADH-NAD+ 氧化还原状态的荧光生物传感器。初始构建报告 [NADH]×[H+]/[NAD+]，通过定点突变消除其 pH 敏感性。工程化...
"Quenchbodies": quench-based antibody probes that show antigen-dependent fluorescence.
本文报道一种新型无试剂荧光生物传感器策略，其原理是抗体结构域上荧光团的淬灭效应随抗原结合而被解除。作者利用无细胞翻译介导的位置特异性蛋白标记系统，将荧光团定点引入抗体单链可变区（scFv）N端，发现 N端标记的 scFv 在结合抗原后出现显著荧光增强。以羧基四甲基罗丹明（TAMRA）标记的抗骨钙素 scFv 为模型，通过突变分析发现...
Quantum dot-based immunochromatography test strip for rapid, quantitative and sensitive detection of alpha fetoprotein.
肿瘤标志物快速、定量、高灵敏高特异检测对癌症临床诊断与治疗至关重要。本文报道了一种新型便携式荧光生物传感器，将量子点（QD）与免疫层析试纸条（ICTS）及自制试纸条读数仪集成，用于人血清肿瘤标志物检测。以甲胎蛋白（AFP）作为模型肿瘤标志物，验证该免疫传感器性能。该传感器基于在 ICTS 上进行的夹心免疫反应，检测线和质控线上捕获的...
Unimolecular catalytic DNA biosensor for amplified detection of L-histidine via an enzymatic recycling cleavage strategy.
荧光催化信标已成为通用传感平台，但多数体系需将DNAzyme与荧光团-淬灭剂共价修饰，合成路线复杂、成本高且产率低。本文构建了一种荧光级联催化信标，将分子识别模块与信号报告模块分离，既避免了对DNAzyme的修饰，又通过基于内切酶的级联酶促信号放大提高了灵敏度。以未修饰的L-组氨酸依赖DNAzyme HD3-ES为识别元件，L-组氨...
Intradomain cleavage of inhibitory prodomain is essential to protumorigenic function of membrane type-1 matrix metalloproteinase (MT1-MMP) in vivo.
侵袭性肿瘤细胞依赖细胞周围蛋白水解突破细胞外基质和基底膜屏障，膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）是癌细胞表面蛋白水解事件的主要介质。MT1-MMP 以酶原形式合成，其 N 端抑制性前结构域维持潜伏状态；分泌途径中 furin 切割 R108RKR1112Y112 位点，但完整前结构域仍非共价抑制新生酶。作者构建含 MT1-MM...
Optical detection of choline and acetylcholine based on H₂O₂-sensitive quantum dots.
本文构建了基于过氧化氢(H2O2)敏感量子点(QDs)的简单、快速、高灵敏生物传感器，用于胆碱(choline)和乙酰胆碱(ACh)检测。该传感器由H2O2敏感QDs和酶组成，不需要复杂的功能化或偶联过程。胆碱经酶催化氧化生成H2O2；ACh则先被酶水解为胆碱，再经酶催化产生H2O2。产生的H2O2通过电子转移(ET)过程使QDs荧...
Fluorescence detection of GDP in real time with the reagentless biosensor rhodamine-ParM.
开发新型荧光方法检测关键生物分子对基础研究和药物发现具有重要意义。ADP和GDP是细胞内多种反应的产物，包括核苷三磷酸酶和激酶催化的反应。本实验室此前基于细菌肌动蛋白同源物ParM的荧光团加合物开发了ADP生物传感器。本研究证明其中一种传感器——四甲基罗丹明标记的ParM（rhodamine–ParM）也可监测GDP。该传感器能在毫...
Mitochondrial calcium uptake regulates rapid calcium transients in skeletal muscle during excitation-contraction (E-C) coupling.
肌浆网与线粒体在细胞内 Ca2+ 信号控制中的偶联缺陷被认为参与神经肌肉疾病进展。我们此前发现肌萎缩侧索硬化（ALS）小鼠模型骨骼肌中线粒体功能呈节段性丧失，并伴随肌浆网 Ca2+ 释放活性升高且失控。该局部线粒体缺陷使研究者可在同一肌纤维内比较线粒体正常与缺陷区域，从而评估线粒体在兴奋-收缩（E-C）偶联中清除 Ca2+ 的贡献。...
The development of a silica nanoparticle-based label-free DNA biosensor.
本文报道了一种基于二氧化硅纳米颗粒的无标记DNA生物传感器，可用于检测炭疽杆菌（Bacillus anthracis）相关未标记单链寡核苷酸。该传感器利用固定在纳米颗粒表面的阳离子共轭聚合物聚噻吩与单链寡核苷酸及杂交寡核苷酸相互作用时发生的光学变化：只有当与聚合物结合的探针ssDNA与互补目标杂交后，才出现荧光信号。为提高灵敏度，作...
A fluorescence microscopy assay for monitoring mitophagy in the yeast Saccharomyces cerevisiae.
自噬在多种条件下参与细胞组分周转，既是稳态维持机制，也是质量控制机制，可选择性降解包括细胞器在内的细胞物质。若受损或多余线粒体未被清除，可能威胁细胞稳态与存活。在酿酒酵母中，营养缺乏（如氮饥饿）或损伤可诱导线粒体选择性自噬，即线粒体自噬。本文描述一种简单荧光显微镜方法，用于评估酵母细胞中的自噬，并重点展示监测线粒体自噬。该方法使用双...
Design and synthesis of monofunctionalized, water-soluble conjugated polymers for biosensing and imaging applications.
本文报道了一类分子量可控、无离子基团、水溶性好且发射量子产率高的单功能化共轭聚合物，用于改善荧光生物传感器与成像应用。作者以2-溴-7-碘芴为预单体，在9,9′位引入八聚乙二醇单甲醚侧链，获得水溶性预单体4。通过高收率合成有机金属引发剂(dppe)Ni(Ph)Br，并在单晶X射线衍射中确认其结构，使预单体4在30秒内完成聚合，获得平...