Protein science : a publication of the Protein Society
2010
Lindgren J, Wahlström A, Danielsson J, Markova N 等 9 人
淀粉样蛋白β(Aβ)肽聚集被认为是阿尔茨海默病发生和进展的重要因素。高亲和力和选择性结合 Aβ 肽的分子是研究聚集过程的重要工具。此前通过噬菌体展示筛选的 Aβ 结合 Affibody 分子 ZAb3 能以纳摩尔亲和力结合 Aβ(1-40) 并抑制 Aβ 肽聚集。本研究构建了更适合化学合成的 ZAb3 截短功能版本。通过固相肽合成制...
Biosensors & bioelectronics
2010
Piliarik M, Bocková M, Homola J
本文报道了一种用于稀释血液血浆中蛋白生物标志物高通量筛查的表面等离子共振(SPR)生物传感器。该传感器将高分辨率SPR成像传感器与具有低污染背景的高密度蛋白阵列相结合。SPR成像传感器采用偏振对比和先进参考补偿技术,可提供120个传感区,每个传感区尺寸为200 μm×150 μm。抗体通过抗体-寡核苷酸偶联物与微点样在传感器表面的巯...
Biosensors & bioelectronics
2010
Sípová H, Vaisocherová H, Stěpánek J, Homola J
本研究报道了一种用于监测核糖核酸酶H(RNase H)活性的双通道表面等离子共振(SPR)检测方法。该方法利用多通道SPR生物传感器,在同一流路中设置两个独立功能化传感区:上游传感区固定含RNA底物和DNA尾的嵌合寡核苷酸探针,用于实时监测RNase H对RNA链的切割;下游传感区固定特异性DNA探针,用于捕获切割反应释放的片段。通...
Biochemistry
2010
Hantgan RR, Stahle MC, Lord ST
本研究证明两个正交事件调控整合素RIIbβ3与其主要生理配体纤维蛋白原的相互作用:RIIb-β3界面构象变化,以及纤维蛋白原γ模块羧基末端柔性。作者将RIIbβ3捕获于生物传感器表面,用表面等离子共振(SPR)检测结合。依替巴肽预激的RIIbβ3在37℃下与纤维蛋白原结合的kon约2×10^4 L mol^-1 s^-1,koff约...
Journal of medicinal chemistry
2010
de Kloe GE, Retra K, Geitmann M, Källblad P 等 12 人
可溶性乙酰胆碱结合蛋白(AChBP)是烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)配体结合结构域的同源物。为引导未来采用表面等离子共振(SPR)生物传感器技术进行无标记、直接结合的生物物理片段筛选,作者基于对一组具有纳摩尔亲和力的α7 nAChR选择性含奎宁环配体的解构,构建了聚焦片段库。利用SPR生物传感器检测片段及其母体化合物与AChBP的...
Analytical and bioanalytical chemistry
2010
Špringer T, Piliarik M, Homola J
本文报道了一种用于复杂介质中生物分子相互作用实时监测的新型生物传感器方法。该方法以人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG)与其抗体在血浆中的相互作用为模型,利用表面等离子共振(SPR)生物传感器和无分散微流控系统,交替注入血浆样品与洗涤液,使非特异性吸附蛋白被快速去除而特异性结合得以保...
Biochemistry
2010
Walsh ST
白介素-7(IL-7)与其α受体 IL-7RR 的相互作用对 B 细胞和 T 细胞的发育、存活及稳态至关重要。人 IL-7RR 的 N-糖基化通过变构机制使其对人 IL-7 的结合亲和力较非糖基化受体提高约 300 倍,而 IL-7RR 的 N-糖链并不直接参与结合界面。本研究采用表面等离子共振(SPR)光谱,系统解析 IL-7 与...
Biosensors & bioelectronics
2010
Pan S, Xu J, Shu Y, Wang F 等 11 人
DNA甲基化在维持细胞功能中起重要作用,多种人类疾病尤其是癌症与异常DNA甲基化相关,但现有甲基化检测方法复杂且耗时。本研究以肿瘤抑制基因腺瘤性息肉病基因(APC)启动子作为靶DNA序列,利用寡核苷酸探针杂交与特异性蛋白结合实现双重识别。首先,互补靶DNA被固定在表面等离子共振(SPR)芯片上的探针捕获;随后,重组甲基-CpG结合域...
Biosensors & bioelectronics
2010
Ng SP, Wu CM, Wu SY, Ho HP 等 5 人
本文提出一种基于差分光谱干涉的宽动态范围相位敏感表面等离子共振(SPR)生物传感器。传统光谱SPR仅监测反射光谱中的SPR凹陷,而该系统获取经历SPR变换的整个电磁场的光谱相位信息。在固定入射角下,SPR引起的相位变化具有高度波长依赖性,因此通过相位敏感检测可在整个光谱范围内持续保持超高灵敏度,以响应样品折射率变化。系统采用白光LE...
Colloids and surfaces. B, Biointerfaces
2010
Wang J, Sun Y, Wang L, Zhu X 等 6 人
本文制备了以3-巯基丙酸(MPA)修饰的核壳型Fe3O4/Au纳米复合材料,并将其应用于表面等离子共振(SPR)生物传感器。通过紫外-可见光谱和透射电子显微镜对Fe3O4/Au纳米复合材料进行了详细表征。利用其磁性及优异光学性质,Fe3O4/Au纳米复合材料作为山羊抗人IgM的固体载体,可通过磁柱将抗体固定在SPR芯片表面。这种新型...
Analytical biochemistry
2010
Rich RL, Quinn JG, Morton T, Stepp JD 等 5 人
本文报道了一种用于SensíQ Pioneer表面等离子共振(SPR)生物传感器的新型分析物注射方法,称为FastStep。该方法通过在反应流池入口前立即合并缓冲液流和样品流,使仪器能够仅从单个分析物样品自动产生二倍或三倍稀释系列,分别包含七个或五个浓度,从而覆盖约100倍浓度范围。作者利用蔗糖注射证明各浓度阶梯在起始时间和响应水平...
Journal of colloid and interface science
2010
Wang L, Sun Y, Wang J, Wang J 等 7 人
本文报道了一种基于水溶性ZnO–Au纳米复合材料的表面等离子共振(SPR)生物传感器,用于检测兔免疫球蛋白G(rabbit IgG)。ZnO–Au纳米复合材料可通过共价结合方式与蛋白质连接,构建具有独特光学性质和良好生物相容性的蛋白探针,从而增强SPR传感器的灵敏度。在优化条件下,该传感器对兔IgG在0.15–20.00 μg/mL...
Analytical and bioanalytical chemistry
2010
Hegnerová K, Piliarik M, Šteinbachová M, Flegelová Z 等 6 人
本文报道一种用于检测内分泌干扰物双酚A(Bisphenol A,BpA)的紧凑型表面等离子共振(SPR)生物传感器。该传感器基于便携式六通道表面等离子共振耦合-分散(SPRCD)传感平台,采用结合抑制检测格式:样品中的BpA与固定浓度的抗BpA抗体竞争结合,未反应抗体被固定在传感器表面的BSA-BpA偶联物捕获,SPR信号随捕获抗体...
The Analyst
2010
Cunningham S, Gerlach JQ, Kane M, Joshi L
生物传感器领域已发展出多种用于快速、灵敏检测、鉴定和定量目标分析物的技术。与核酸和蛋白质生物传感器相比,用于检测碳水化合物及其糖缀合物的“糖生物传感器”仍处于起步阶段。糖基化是蛋白质翻译后修饰中最丰富且重要的类型之一,糖链结构可反映细胞微环境和生理状态,并在感染、癌症、心血管及神经疾病中发生改变,因此具有巨大诊断潜力。本文简要介绍糖...
Journal of molecular biology
2010
Munde M, Kumar A, Nhili R, Depauw S 等 11 人
随着基因组序列信息增加,利用可进入细胞的合成小分子调控基因表达成为可能,但能选择性识别不同 AT 序列的小分子仍有限。多数 DNA 小沟结合剂偏好 AATT 等 A-tract 序列,却难以区分不同 AT 序列。本文围绕 DB293 及其衍生物,研究杂环双胍阳离子在 TTAA 位点诱导二聚体结合的结构基础、结合亲和力与序列特异性。作...
Journal of colloid and interface science
2010
Onaizi SA, He L, Middelberg AP
本研究构建并评价了一种用于研究纺织染料表面蛋白污渍酶清洗的表面等离子共振(SPR)生物传感器。将反应性染料Cibacron Blue F3GA共价连接到由β-巯基乙醇和α-硫辛酸组成的自组装单分子层修饰的金芯片上,形成模拟染色织物的染料表面;随后使Rubisco蛋白在该表面吸附形成模型蛋白污渍,并采用不同浓度的枯草杆菌蛋白酶A进行清...
Biochemistry
2010
Geitmann M, Retra K, de Kloe GE, Homan E 等 7 人
本研究以淡水螺 Lymnaea stagnalis 的乙酰胆碱结合蛋白(AChBP)作为 Cys-loop 配体门控离子通道胞外域模型,采用乙酰胆碱、尼古丁、epibatidine 及一系列取代奎宁环化合物作为配体,建立了基于表面等离子共振(SPR)生物传感器的直接相互作用测定方法。该方法可实时表征固定化 AChBP 与小分子激动剂...
Analytical chemistry
2010
Frasconi M, Tortolini C, Botrè F, Mazzei F
合成并固定了双功能羟基/巯基官能化第四代聚酰胺胺树突状聚合物(G4-PAMAM)包埋金纳米粒子(Au NP)于混合自组装单分子层(SAM)修饰金表面。该修饰表面对宽分子量与等电点蛋白的非特异性吸附具有抗性。部分树突状聚合物巯基转化为酰肼基团,提供活化表面以进一步固定受体,构建免疫亲和反应传感表面。本文基于竞争免疫分析原理实现胰岛素表...
Analytical and bioanalytical chemistry
2010
Andersson H, Kågedal B, Mandenius CF
肌钙蛋白T(TnT)是研究药物诱导心脏细胞毒性效应的有用生物标志物。本文报道了一种表面等离子共振(SPR)生物传感器,用于在体外监测活性HL-1心肌细胞暴露于心脏毒性物质时TnT的释放。在SPR免疫传感器中比较了两种人TnT单克隆抗体,以分析TnT释放。直接检测模式下TnT检测限为30 ng/ml,夹心检测模式下为10 ng/ml。...
Biochemistry
2010
Domínguez JL, Christopeit T, Villaverde MC, Gossas T 等 10 人
BACE-1是参与β-淀粉样肽切割的天冬氨酸蛋白酶,其催化APP水解是阿尔茨海默病淀粉样斑块形成的限速步骤。寻找新型BACE-1抑制剂的关键问题之一是抑制剂与酶结合的最适pH:酶在酸性pH催化活性最高,而细胞活性抑制剂可能在较高pH结合最优。本研究采用基于表面等离子共振(SPR)生物传感器的方法,测定一组化学基团多样的抑制剂对BAC...