表面等离子共振（SPR）生物传感器技术因快速、无标记、实时和可重复等优势，被广泛用于生命科学和食品/动物健康分析。然而，在牛血清等复杂生物样品中，血清蛋白与羧甲基葡聚糖（CM-dextran）芯片表面发生严重非特异性结合（NSB），限制了直接检测。本文以牛血清中牛瘦素（bovine leptin）的直接测量为模型，开发并优化了一种用...
我们开发了一种新型自动化系统，通过整合表面等离子共振（SPR）生物传感器与高灵敏度纳流液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）来分析蛋白复合物。在哺乳动物细胞中表达同时带有 His 标签、FLAG 标签和生物素化序列的诱饵蛋白；利用 His 标签从细胞裂解液中初步纯化后，将样品蛋白混合物施加到 SPR 生物传感器上，使蛋白复合物捕获在...
普遍存在的化学物质可能干扰对脊椎动物发育和生理至关重要的甲状腺系统。本研究建立并优化了一种基于表面等离子共振（SPR）生物传感器的高通量筛选方法，用于快速检测具有甲状腺素（T4）运输干扰活性的化合物。该方法以固定于生物传感器芯片表面的 T4 为配体，分别利用主要甲状腺激素运输蛋白甲状腺素结合球蛋白（TBG）和转甲状腺素蛋白（TTR）...
胆固醇酯转移蛋白（CETP）在不同类型血浆脂蛋白之间转移中性脂质，其抑制剂可提高血浆胆固醇中与高密度脂蛋白（HDL）结合的比例，正被开发用于心血管疾病的预防和治疗，但其分子机制尚未完全阐明。为研究抑制剂与CETP的相互作用，作者将torcetrapib类似物偶联到不同生物素终止间隔臂上，并在琼脂糖珠和表面等离子共振（SPR）生物传感...
本文报道了差分相位表面等离子共振（SPR）成像在二维蛋白质生物传感器阵列中的应用。与常规角度 SPR 技术相比，该相位成像方法在光学传感元件利用效率上具有明显优势：角度法中每个传感位点需要一维探测器阵列定位 SPR 角度凹陷，二维成像器件最多只能提供一维 SPR 生物传感器阵列；而相位敏感 SPR 在时域采集数据，干涉图中每个像素可...
本研究证明，在牛血清白蛋白（BSA）上形成的合成异肽可通过基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器方法进行定量分析。能与合成异肽及 D-二聚体中天然异肽交联反应（但不与非交联纤维蛋白单体反应）的单克隆 IgM 抗体 81D4 被共价固定于羧甲基化葡聚糖（CM5）表面，其免疫捕获效率良好。81D4 与合成异肽相互作用的亲和力估计约为 ...
本研究开发了一种基于表面等离子共振（SPR）原理的光学生物传感器抑制免疫分析方法，用于食品动物源样品中13种喹诺酮/氟喹诺酮（包括氟甲喹）的筛查。研究将多种喹诺酮衍生物固定于SPR传感器芯片表面，并系统评价不同多克隆抗体和工程抗体在有无游离喹诺酮存在时的结合行为。主要挑战是在保证其他化合物检测效果的同时检测氟甲喹。最终采用针对双表位...
本文综述了苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis, Bt）伴孢晶体蛋白的研究进展。Bt 可产生对昆虫高度特异毒性的δ-内毒素，包括Cry和Cyt蛋白；部分非杀虫菌株的伴孢晶体蛋白还具有选择性杀伤人癌细胞的能力，被命名为parasporin。文中首先介绍一种基于表面等离子共振（SPR）的光学生物传感器检测方法：将...
生物传感器技术由特异性生物识别元件与用于信号处理的换能器组合而成。自提出以来，生物传感器被认为将在医学、农业、食品安全、国土安全、环境与工业监测中发挥重要作用。然而，与大量论文和专利活动所反映的研究产出相比，生物传感器技术的商业化明显滞后。技术转移缓慢且有限的原因可归因于成本考量以及若干关键技术障碍。分析化学在自动化、微型化和面向多...
遗传性包涵体肌病（HIBM）是一种由唾液酸生物合成关键酶 UDP-N-乙酰氨基葡萄糖 2-差向异构酶/N-乙酰甘露糖胺激酶（GNE）突变引起的罕见神经肌肉疾病。为探索 GNE 在骨骼肌中可能的新功能，作者采用基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器方法，对人骨骼肌原代培养细胞裂解液的阴离子交换组分进行 GNE 相互作用蛋白筛选。体外...
本文报道了一种在金表面自组装单分子层上构建含生物素磷脂囊泡层，用于表面等离子共振（SPR）生物传感器固定生物素化受体蛋白的技术。作者以糖端烷基二硫醚二硫双(1-脱氧-D-山梨醇-1-氨基甲酰戊烷)（DDGP）形成亲水自组装单分子层，并比较了DOPC囊泡在DDGP、11-巯基十一烷酸、11-巯基十一烷醇、11-氨基-1-十一烷硫醇和1...
本文证明，携带构象复杂膜蛋白的病毒样颗粒（lipoparticles）可作为可溶性探针用于膜蛋白相互作用研究。lipoparticles由哺乳动物细胞共表达目标膜蛋白与逆转录病毒Gag核心蛋白后自组装出芽形成，直径约150 nm，非感染性，均一且能保持膜蛋白天然构象。作者将lipoparticles作为流动相试剂，使其流过固定有抗体...
本研究开发了一种基于吸收型表面等离子共振（SPRAbs）的生物传感器探针，用于简单、可重复地测定过氧化氢。该探针采用改良Trinder显色试剂：在辣根过氧化物酶（HRP）存在下，过氧化氢催化N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐一水合物（MAOS）与4-氨基安替比林（4-AA）发生氧化偶联，生成最大吸收波长为...
本文提出并开发了一种新型差分相位敏感表面等离子共振生物传感器（DP-SPRB）。该传感器将双频激光与差分放大器集成，利用 P 波在金属/介质界面激发表面等离子体激元（SPW），S 波全反射作为参考，从而把相位调制解析地转换为幅度调制，并通过常规包络检测技术实时解调差分相位。为验证其高检测灵敏度，作者分别测试了低浓度蔗糖水溶液和甘油水...
本文报道了一种基于芳香烷二硫醇和聚乙二醇（OEG）连接子自组装单分子层（SAMs）的新型表面等离子共振（SPR）免疫传感器表面，用于高灵敏检测2,4,6-三硝基甲苯（TNT）。首先在Au传感器表面形成芳香烷二硫醇SAMs，再通过OEG链共价固定TNT类似物。两种含氨基OEG化合物以一定比例偶联到SAMs羧基末端：H2N(C2H4O)...
本研究采用生物传感器筛选策略和专门设计的片段库，鉴定了基质金属蛋白酶12（MMP-12）的小分子抑制剂。作者将三种MMP-12变体（野生型、ilomastat稳定野生型和E219A失活突变体）以及含活性位点锌离子的参考蛋白碳酸酐酶II（CA II）固定于表面等离子共振（SPR）传感器芯片上，连续监测片段与靶标及参考蛋白的相互作用。该...
表面等离子共振（SPR）光学生物传感器已广泛用于测定多种大分子相互作用的动力学参数。传统实验通常任意选择分析物与缓冲液的注入时间以及不同分析物浓度，因此所得结合/解离曲线未必能为动力学参数提供足够置信度，标准误可能偏大。本文提出一种迭代式在线优化方法，将所需标准误作为约束条件，自动确定分析物浓度、结合期与解离期等实验变量，从而在满足...
二噁英样多氯联苯（DL-PCBs）常构成鱼类样品中二噁英毒性当量（TEQ）的主要贡献，因此开发快速筛查零售鱼中 DL-PCBs TEQ 浓度的方法具有重要意义。本研究建立了一种基于表面等离子共振（SPR）传感器的快速生物传感器免疫分析（BIA），采用 Biacore 3000 检测 DL-PCBs。该 BIA 对鱼类中通常含量最高的...
矶毒素（YTX）是由海洋甲藻产生的双硫酸化聚醚毒素。虽然尚无明确证据表明 YTX 对人类有毒，但它是小鼠生物测定法检测腹泻性贝类中毒（DSP）毒素时产生假阳性的主要原因。本研究开发了一种基于表面等离子共振（SPR）的 YTX 检测与定量方法，采用 BiaCore X 仪器。该检测基于 YTX 与其细胞靶标之一磷酸二酯酶（PDE）的直...
表面等离子共振（SPR）技术是测量分子与表面结合及结合常数的成熟方法。本研究将该方法拓展用于噬菌体-细菌相互作用研究，采用双通道微流控 SPR 传感器芯片检测废水中的体噬菌体（somatic coliphages）。体噬菌体被提议作为水体粪便污染的指示物，研究以其宿主大肠杆菌 WG5（E. coli WG5）作为选择性识别靶标。大肠...