Ch14.18 是靶向双唾液酸神经节苷脂 GD2 的鼠-人嵌合单克隆抗体，已在儿童高危神经母细胞瘤治疗中显示疗效。为应对工艺变更和制造放大带来的产品可比性问题，需对电荷异质性、糖基化谱、分子状态与聚集、Fcγ 受体结合亲和力及功能活性进行系统表征。本文报道了内部开发并确认的成像毛细管等电聚焦（imaged cIEF）用于电荷异质性，...
本研究采用直接金属纳米压印法，一步制备出金属波纹结构，用作高灵敏度等离激元传感器。该波纹金膜可同时响应表面等离子共振（SPR）波长位移和折射匹配效应。与已报道的 SPR 传感器相比，波纹金膜具有约 800 nm/RIU 的高灵敏度，甚至更高。由于独特的折射匹配效应，通过测量金/基底 SPR 模式的透射强度即可实现折射率传感，且无需光...
肝素结合蛋白（HBP）已被证明存在于克氏锥虫的感染型中，并参与对哺乳动物细胞的识别与侵入。本研究评估这些蛋白在寄生虫-媒介相互作用中的潜在生物学功能。通过肝素亲和层析从锥虫上体中分离出分子量分别为65.8 kDa和59 kDa的HBP，并用生物素标记的硫酸化糖胺聚糖（GAG）进行鉴定。表面等离子共振（SPR）生物传感器分析根据结合与...
过去几十年，研究者发展了多种合成路线，可制备球形、棒状、立方、空心等不同形状金属纳米结构。由于这些纳米结构具有块体材料不具备的优异性质，其应用受到广泛关注。本综述报道了金属纳米结构在临床与生物传感器领域的近期进展。第一部分重点介绍不同形状金属纳米结构的合成方法及其光学性质；第二、三部分介绍金纳米颗粒（AuNP）的组装与阵列，并说明金...
消除非特异性蛋白吸附是许多生物材料应用中的重要挑战。针对该问题，本研究报道了由带正电的[2-(丙烯酰氧基)乙基]三甲基氯化铵（TMA）和带负电的2-羧乙基丙烯酸酯（CAA）单体组成的两性共聚物的双功能特性。此前TMA:CAA共聚物已被证明具有抗污性能，但最佳抗污条件尚未确定。为此，作者通过调控表面引发原子转移自由基聚合（ATRP）条...
本文报道了一种用于无标记检测短链和长链核酸序列的新型生物传感方法，尤其适用于具有预测二级结构的RNA。该方法选用8-氨基腺嘌呤修饰的平行链DNA尾夹作为亲和生物受体，使其在中性pH下与含同嘌呤-同嘧啶区的核酸靶标杂交时形成稳定三链螺旋。作者利用自制表面等离子共振（SPR）传感器实时监测金表面折射率变化，无需标记或扩增。结果显示，该方...
亲和常数（kd、ka 和 KD）可通过固定化配体方法（如免疫分析和无标记生物传感器技术）测定。本文提出一种新的表面等离子共振（SPR）阵列成像方法，可获得可视为单生物分子相互作用最佳估计的亲和常数。该方法将不同配体密度和分析物浓度下测得的速率常数（kd、ka）及解离平衡常数（KD）外推至零响应水平（KD_R0），从而模拟仅一个配体分...
表面等离子共振（SPR）生物传感器可通过共振角（AR）变化实时、无标记地检测活细胞内信号事件。作者此前报道，角质形成细胞上表皮生长因子受体（EGFR）激活会引起独特的三相AR变化，而肥大细胞上IgE受体或腺苷A3受体激活仅引起短暂单相AR升高。为阐明EGFR激活诱导AR变化的机制，作者将野生型和突变型EGFR cDNA导入中国仓鼠卵...
本文在大肠杆菌中过表达来源于 Cellulosimicrobium cellulans 内切-1,3-β-葡聚糖酶催化结构域 C 端的碳水化合物结合模块 13（CBM13，CBM-DK），并利用表面等离子共振（SPR）生物传感器和等温滴定量热（ITC）分析其与 β-葡聚糖、层流胶（laminarin）及层流寡糖（laminariol...
在无标记生物分子相互作用分析中，标准注入通常提供均匀的分析物浓度。利用泰勒分散（Taylor dispersion）的替代注入方式可在毛细管中形成连续的分析物浓度梯度，使单次注入即可记录完整的剂量响应曲线。本文使用商用表面等离子共振（SPR）生物传感器展示了该方法的增强生物物理表征能力。将动力学相互作用模型局部拟合泰勒分散曲线，除获...
阿利吉仑（aliskiren）是一种已获批用于高血压治疗的选择性肾素抑制剂，其药效持续时间似乎长于根据循环半衰期所能预期的水平。本研究旨在表征阿利吉仑与人肾素相互作用的动力学。作者采用三种方法评估：首先通过监测荧光底物裂解评价重组人肾素抑制；其次通过测量有无抑制剂时 1 h 内生成的血管紧张素 I 监测人血浆肾素活性（PRA）；最后...
生物识别元件在传感器芯片表面的固定是构建生物传感器的关键步骤。多数生物传感器表面采用金属换能层，蛋白质等识别元件可直接吸附于金属或二氧化硅表面，但随机取向和界面相互作用可能导致分子变性、活性降低或丧失。自组装单分子层（SAMs）可有效隔离生物识别元件与传感器表面，实现配体的稳定固定，支持重复结合与再生，并降低非特异性吸附。本研究在表...
本文首次报道基于κ-酪蛋白（κ-CN）的电化学和表面等离子共振（SPR）生物传感器，用于评估凝乳酶（rennet）凝血活性。电化学传感器构建于修饰有双硫代双N-琥珀酰亚胺基丙酸酯（DTSP）自组装单层的金电极上；SPR在再生羧甲基化葡聚糖（CM5）金表面进行。两种传感器均共价固定κ-CN。电化学传感器用循环伏安、差分脉冲伏安和电化学...
Sortase A介导的蛋白连接是一种源自金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白展示机制的生物学共价偶联系统，需要三种组分：纯化的SrtA酶、含LPXTG识别序列的底物和寡甘氨酸受体分子。本文从亲本抗EGFR单克隆抗体528克隆其单链Fv片段sc528，并在C端引入LPETGG标签序列。利用重组SrtA，作者成功将GGG-生物素连接至sc528。...
本文报道了自折叠深穴腔分子首次应用于金表面。作者合成了带硫醚脚的八酰胺深穴腔分子，并通过循环伏安和表面等离子共振（SPR）方法研究其在清洁金表面的自组装行为。由于穴腔分子在质子性溶剂中存在折叠与展开构象平衡，单纯吸附难以形成完整单分子层；加入胆碱作为模板客体，或与11-巯基十一烷酸（MUA）、十八烷硫醇（ODT）等空间填充硫醇共吸附...
本文探讨基于检测单个分子结合事件的生物分析方法的性能极限，以流动式表面等离子共振（SPR）生物传感器为案例，比较基于局域表面等离子体（LSP）检测单个结合事件与基于传播表面等离子体（PSP）积分大量同时结合事件两种构型。研究通过微流控流动池中分析物输运与表面识别元件结合的动力学/扩散方程模拟，考察分析物大小及结合/解离速率对检测概率...
本文开发了一种基于光学表面等离子共振（SPR）的创新、特异且无标记检测方法，并用于构建可现场快速定量检测传染性法氏囊病病毒（IBDV）的生物分析仪。该分析仪由微流控池、温度调节器、集成生物传感器、光学平台、光电转换装置中的电子控制单元以及通用串行总线（USB）接口电路板组成。检测流程经过系统描述并实验验证。采用自组装技术，通过双功能...
为鉴定细胞朊蛋白（PrPC）的分子相互作用伙伴，作者对牛脑 cDNA 表达文库进行酵母双杂交筛选，鉴定出钾通道四聚化结构域蛋白 1（KCTD1）为 PrPC 相互作用蛋白。删除图谱显示，PrPC 通过无规卷曲的 PrP51-136 区域特异性结合 KCTD1。作者进一步通过体内共免疫沉淀和体外生物传感器实验确认 PrPC 与 KCT...
利什曼病是由媒介传播的重要公共卫生问题，利什曼原虫中的糖胺聚糖配体可作为控制该病的新靶点。本研究报道了巴西利什曼原虫（Leishmania (Viannia) braziliensis）前鞭毛体中肝素结合蛋白（HBPs）的亚细胞分布及其生化特性。前鞭毛体经差速离心分离为鞭毛和膜组分，并分别上样HiTrap肝素亲和层析柱，洗脱的肝素结...
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）和无扩散微流控的无标记生物传感器系统，用于直接、实时检测可溶性血管内皮生长因子受体1（sVEGFR-1）。该检测策略利用sVEGFR-1与其高亲和配体血管内皮生长因子A（VEGF-A）之间的亲和相互作用；VEGF-A通过酰胺键共价固定于SPR传感表面，并保留参与受体结合的关键负电残基，从而维...