本文首次报道基于逐步体外分子进化的Affibody亲和力成熟：对ZRAF322全部58残基三螺旋束基因进行错误PCR（epPCR）扩增引入多样性，再用核糖体展示（RD）筛选。ZRAF322以1.9 μM KD结合人Raf-1（hRaf-1），后者是MAPK/ERK通路关键蛋白激酶。进化过程通过DNA测序和SPR生物传感器结合分析在基...
本文报道了一种基于含甲酰基改性聚对二甲苯（parylene-H）薄膜的肽和蛋白一步固定方法，适用于微孔板免疫分析和表面等离子共振（SPR）生物传感器。parylene-H 表面的甲酰基可与肽和蛋白中的伯胺直接发生共价结合，无需戊二醛活化步骤，从而简化固定流程并减少小分子肽/蛋白在洗涤过程中的流失。研究以生物素化瓜氨酸化环肽（biot...
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器系统，用于检测结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）正常和突变 rpoB 基因相关寡核苷酸序列。通过在金传感表面固定含硫醇修饰的捕获探针 P2，构建生物选择性识别层；该探针包含 rpoB 基因第531密码子 TCG→TTG 突变，该突变与利福平耐药相...
Id1蛋白是bHLH转录因子的显性负性拮抗剂，通过与bHLH蛋白形成高亲和力异源二聚体阻止其结合DNA，从而抑制分化相关基因转录，并参与细胞增殖、分化和肿瘤发生。本研究以具有较高Id1亲和力和抑癌活性的肽3C为先导肽，设计并合成了一系列N端和C端截短类似物，采用SPR生物传感器测定各肽与Id1或Id1-HLH结构域的亲和力，用圆二色...
人工材料接触血液会诱导蛋白吸附、补体激活、凝血、血小板激活、炎症和细胞黏附等反应，理解并控制这些界面相互作用对血液接触型生物材料开发至关重要。补体系统由约30种液相和膜结合蛋白组成，可被人工聚合物材料激活，并释放C3a、iC3b、C5a、SC5b-9等片段。传统ELISA可检测释放片段，但难以实时监测生理条件下动态界面事件。表面等离...
基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器是测量分子相互作用的成熟方法，但用于G蛋白偶联受体（GPCR）研究时通常受限于需将受体经去垢剂溶解后再重建到脂质环境中。本文以趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12为模型，提出一种高重复性的SPR生物传感器方法：利用慢病毒颗粒在出芽过程中携带细胞膜片段，将CXCR4以天然脂质膜环境展示于病...
环氧合酶-2（COX-2）是一种诱导性酶，参与乳腺癌进展和血管生成。本研究旨在定量检测COX-2浓度，并分析其与侵袭性导管癌患者临床病理参数及化疗反应的关系。作者采用基于表面等离子共振（SPR）的新型生物传感器，检测84例乳腺癌患者（48例新辅助化疗、36例辅助化疗）和40例年龄、性别匹配健康人血清中的COX-2水平。结果显示，患者...
本研究从含1040个片段的库中鉴定出一种可抑制野生型及耐药型人类免疫缺陷病毒1型逆转录酶（HIV-1 RT）的新型支架。通过Tversky相似性分析表明，库中片段与已知非核苷逆转录酶抑制剂（NNRTI）结构差异显著。作者采用表面等离子共振（SPR）生物传感器相互作用分析与酶抑制实验相结合的筛选策略：先以短浓度系列进行SPR初筛，再结...
本研究设计并实验验证了一种用于表面等离子共振（SPR）生物传感器筛选的新片段库。该库从460万种可购买商品化合物中，经一系列理化性质和药物化学过滤，最终选出930个片段化合物。作者将片段库针对3个典型药物靶标——HIV-1蛋白酶、凝血酶和碳酸酐酶——以及1个非靶标蛋白人血清白蛋白进行筛选。在筛选条件下，化合物溶解性良好。高灵敏度传感...
为建立高效、可靠地预测药物候选物血清蛋白结合的方法，作者利用表面等离子共振（SPR）生物传感器研究了若干化合物与人血清白蛋白（HSA）及α1-酸性糖蛋白（AGP）相互作用的动力学特性。传统基于合理机理模型、通过速率常数或亲和力进行定量的方法仅适用于少数化合物；部分化合物可估计主要相互作用的亲和力及低亲和力次要相互作用的贡献，但许多化...
表面等离子体共振（SPR）生物传感是一种先进的无标记、实时检测技术，其核心是金属-介质界面处自由电子的集体振荡对界面光学参数变化的高度敏感。本文综述了 SPR 相关仪器设计的新趋势，重点讨论光学激发与耦合方案、微流控与微系统集成、纳米尺度效应对表面等离子体的影响、新材料应用以及 SPR 与其他分析技术的联用。文章回顾了棱镜、光栅、波...
本研究比较了表面等离子共振（SPR）生物传感器、酶联免疫吸附测定（ELISA）和超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）三种方法在葡萄糖-牛血清白蛋白（BSA）模型体系中检测Nε-(羧甲基)赖氨酸（CML）的能力，并考察R-生育酚、阿魏酸、芦丁、硫胺、硫胺单磷酸和硫胺焦磷酸等候选抗糖化剂对CML形成的抑制作用。结果显示，CM...
DNA甲基化在维持细胞功能中起重要作用，多种人类疾病尤其是癌症与异常DNA甲基化相关，但现有甲基化检测方法复杂且耗时。本研究以肿瘤抑制基因腺瘤性息肉病基因（APC）启动子作为靶DNA序列，利用寡核苷酸探针杂交与特异性蛋白结合实现双重识别。首先，互补靶DNA被固定在表面等离子共振（SPR）芯片上的探针捕获；随后，重组甲基-CpG结合域...
本文报道了一种用于SensíQ Pioneer表面等离子共振（SPR）生物传感器的新型分析物注射方法，称为FastStep。该方法通过在反应流池入口前立即合并缓冲液流和样品流，使仪器能够仅从单个分析物样品自动产生二倍或三倍稀释系列，分别包含七个或五个浓度，从而覆盖约100倍浓度范围。作者利用蔗糖注射证明各浓度阶梯在起始时间和响应水平...
本文报道了一种基于水溶性ZnO–Au纳米复合材料的表面等离子共振（SPR）生物传感器，用于检测兔免疫球蛋白G（rabbit IgG）。ZnO–Au纳米复合材料可通过共价结合方式与蛋白质连接，构建具有独特光学性质和良好生物相容性的蛋白探针，从而增强SPR传感器的灵敏度。在优化条件下，该传感器对兔IgG在0.15–20.00 μg/mL...
本文报道一种用于检测内分泌干扰物双酚A（Bisphenol A，BpA）的紧凑型表面等离子共振（SPR）生物传感器。该传感器基于便携式六通道表面等离子共振耦合-分散（SPRCD）传感平台，采用结合抑制检测格式：样品中的BpA与固定浓度的抗BpA抗体竞争结合，未反应抗体被固定在传感器表面的BSA-BpA偶联物捕获，SPR信号随捕获抗体...
本研究构建并评价了一种用于研究纺织染料表面蛋白污渍酶清洗的表面等离子共振（SPR）生物传感器。将反应性染料Cibacron Blue F3GA共价连接到由β-巯基乙醇和α-硫辛酸组成的自组装单分子层修饰的金芯片上，形成模拟染色织物的染料表面；随后使Rubisco蛋白在该表面吸附形成模型蛋白污渍，并采用不同浓度的枯草杆菌蛋白酶A进行清...
氯霉素（CAP）因对食品动物产生不良健康效应，已在欧盟禁止用于食品生产动物。欧洲委员会联合研究中心参考物质与测量研究所（IRMM）正在开发猪肉中氯霉素认证参考物质（CRM）ERM-BB130，用于分析方法的验证和性能确认。该材料拟以液相色谱-串联质谱（LC–MS/MS）和气相色谱-质谱（GC–MS）方法认证，目标氯霉素水平约为最低要...
本文报道了一种用于饮用水中微囊藻毒素（MCs）检测的表面等离子共振（SPR）生物传感器。作者比较了多种检测格式，最终选择竞争抑制法：将微囊藻毒素-LR（MCLR）共价固定于经自组装单分子层（SAM）功能化的 SPR 芯片表面。系统优化了抗体种类与浓度、载液缓冲液组成、封闭液和再生液等影响性能的因素。优化后的 SPR 免疫传感器对 M...
本文报道了一种基于二元图案化肽自组装单层（SAM）的表面等离子共振（SPR）生物传感器，用于在未经处理的粗牛血清中直接检测基质金属蛋白酶-3（MMP-3）。作者筛选了多种3-MPA-Ax-By-OH肽，发现3-MPA-HHHDD-OH在抗非特异性吸附方面优于其他肽及聚乙二醇（PEG）。该肽N端以3-巯基丙酸（3-MPA）结合金表面，...