ACS chemical biology
2010
Ivanov AS, Gnedenko OV, Molnar AA, Archakov AI 等 5 人
NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)通过FAD和FMN将NADPH提供的两个还原当量以单电子转移方式传递给微粒体P450单加氧酶。酵母CPR(yCPR)晶体结构在FMN结合域与连接域界面处发现一个表面暴露的FMN结合位点(FMN2),此外还有大鼠CPR中观察到的埋藏位点。该发现为CPR分子内(FAD与FMN之间)和分子间(F...
Journal of molecular recognition : JMR
2010
Kenny PW
本文是一篇致编辑信,评论 Rich 和 Myszka 发表于《Journal of Molecular Recognition》的综述《Grading the commercial optical biosensor literature—Class of 2008: ‘The Mighty Binders’》。作者指出,表面等离子...
Journal of molecular recognition : JMR
2010
Vorup-Jensen T
本文是对 Rich 与 Myszka 关于 2008 年商业光学生物传感器文献评分的评论。作者认为,该系列评分虽关注表面等离子共振(SPR)实验质量,但标准模糊、语气轻率,且对复杂生物分子相互作用研究存在误解。作者以 Nilsson 等研究载脂蛋白 A-V 与低密度脂蛋白受体家族相互作用、Gehman 等利用 SPR 检测抗菌肽扰动...
Analytical and bioanalytical chemistry
2010
Komolov KE, Aguilà M, Toledo D, Manyosa J 等 6 人
表面等离子共振(SPR)光谱可实时研究蛋白质相互作用动力学,但将其应用于 G 蛋白偶联受体(GPCR)时,受限于受体表达量低以及天然构象对疏水跨膜脂质环境的强烈依赖。本文比较了三种将视紫红质(rhodopsin, Rho)固定于传感器芯片表面的策略,分别采用凝集素 ConA 和针对不同末端位点的抗体进行受体捕获。通过系统考察 pH ...
Protein engineering, design & selection : PEDS
2010
Crona M, Furrer E, Torrents E, Edgell DR 等 5 人
核糖核苷酸还原酶(RNR)负责合成 DNA 复制与修复所需的脱氧核糖核苷酸,其活性受核苷酸对调节位点差异亲和性的复杂变构调控。作者开发了一种稳健且灵敏的方法,通过 30.5 Å 连接臂将生物素化 RNR 偶联到表面等离子共振(SPR)链霉亲和素生物传感器芯片上。对三种 RNR 的系统研究表明,效应核苷酸可增强全酶亚基间相互作用,而底...
Analytical and bioanalytical chemistry
2010
Herranz S, Bocková M, Marazuela MD, Homola J 等 5 人
本文报道了一种用于饮用水中微囊藻毒素(MCs)检测的表面等离子共振(SPR)生物传感器。作者比较了多种检测格式,最终选择竞争抑制法:将微囊藻毒素-LR(MCLR)共价固定于经自组装单分子层(SAM)功能化的 SPR 芯片表面。系统优化了抗体种类与浓度、载液缓冲液组成、封闭液和再生液等影响性能的因素。优化后的 SPR 免疫传感器对 M...
Cytokine
2010
Chou TH, Chuang CY, Wu CM
白介素-6(IL-6)是一种多功能细胞因子,常作为炎症、自身免疫疾病、冠状动脉疾病、神经系统疾病及妊娠相关问题的疾病指标,因此精确量化IL-6水平对疾病诊断和后续治疗具有重要意义。表面等离子共振(SPR)生物传感器通过监测传感器芯片表面折射率变化,灵敏地检测生物分子间相互作用。本研究采用SPR技术测定脂多糖(LPS)诱导的人成纤维细...
The Analyst
2010
Jung SH, Kong DH, Park JH, Lee ST 等 7 人
我们开发了一种基于阵列的光谱表面等离子共振(SPR)生物传感器检测系统,用于高通量分析基质金属蛋白酶(MMP)-3 活性。通过在胺修饰金阵列上固定 MMP-3 底物明胶制备明胶阵列,并通过监测明胶蛋白水解引起的 SPR 波长偏移来测定 MMP-3 活性。SPR 光谱、原子力显微镜和荧光蛋白阵列验证了 MMP-3 的明胶酶活性,该活性...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2010
Luppa PB, Metzger J, Schneider H
表面等离子共振(SPR)是一种新型生物物理检测方法。结合精密表面化学与传感仪器,SPR生物传感器已成为分子相互作用研究的成熟工具,并在相互作用蛋白质组学中发挥作用。当新蛋白在尿液中被发现后,SPR有助于解析其功能。凭借突出的分析特性,SPR正越来越多地进入临床实验室定量分析领域。复杂的尿液蛋白和/或代谢物检测将使SPR生物传感器既可...
Analytical biochemistry
2010
Papalia G, Myszka D
本研究利用Biacore新型可再生链霉亲和素捕获(CAP)传感器芯片,系统考察目标配体生物素化的最小化条件。作者比较了常用胺基生物素化与较少使用的羧基生物素化策略,评估了生物素化试剂与蛋白摩尔比、反应时间、游离生物素去除程度以及不同脱盐方法对链霉亲和素表面捕获效率的影响。结果表明,过度生物素化会使一个配体分子占据多个链霉亲和素位点并...
Analytical biochemistry
2010
Rich RL, Myszka DG
本文评估了富士胶片新型 AP-3000 表面等离子共振(SPR)生物传感器在动力学分析和片段筛选中的性能。作者以碳酸酐酶 II(CAII)为模型体系,表征了 10 种磺酰胺类小分子抑制剂,分子量 98–341 Da,亲和力约跨越 10000 倍(0.4 mM 至 20 nM)。虽然 AP-3000 所得数据总体与 Biacore T...
Biosensors & bioelectronics
2010
Brault ND, Gao C, Xue H, Piliarik M 等 7 人
人血浆和血清中非特异性蛋白吸附严重制约癌症生物标志物生物传感器的性能。本文开发了一种简便的20分钟原位“graft to”接枝方案,将含仿生粘附基团3,4-二羟基-L-苯丙氨酸(DOPA)的两性离子羧基甜菜碱甲基丙烯酸酯(CBMA)聚合物共轭物接枝到二氧化硅(SiO2)基底上。利用表面等离子共振(SPR)生物传感器,系统考察了缓冲液...
Analytical chemistry
2010
Live LS, Bolduc OR, Masson JF
本文报道了利用改进纳米球光刻法在玻璃基底上制备微米级金三角阵列和微孔阵列,并在 Kretschmann 构型下研究其表面等离子共振(SPR)传感性能。采用直径 0.65、0.82、1.0、1.5 和 3.2 μm 的乳胶球作为掩模,获得边长 275–2000 nm 的金三角阵列以及不同周期、孔径和深度的微孔阵列。通过蔗糖溶液折射率标...
Analytical chemistry
2010
Campbell K, Haughey SA, van den Top H, van Egmond H 等 7 人
本文报道了欧盟第六框架计划BioCop项目中开发的一种表面等离子共振(SPR)生物传感器筛查方法,用于检测贝类中的麻痹性贝类毒素(PSP毒素),以替代日益存在伦理问题的鼠生物测定法。该方法将河鲀毒素结合蛋白(SBP)与固定河鲀毒素(STX)的芯片表面联用,并配合简单高效的样品前处理。按照欧盟决定2002/657/EC以及IUPAC和...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2010
Komolov KE, Koch KW
G蛋白偶联受体视紫红质是七次跨膜螺旋受体的经典范例,它可被光激发并将光信号传递至G蛋白介导的级联反应。该受体触发级联中的许多组分可从天然来源以天然形式纯化,因而非常适合生物物理研究。细胞信号转导研究的核心在于定量理解蛋白质-蛋白质相互作用。表面等离子共振(SPR)光谱是一种基于生物传感器的技术,可通过测定动力学参数研究分子相互作用。...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2010
Peeters S, Stakenborg T
在设计DNA生物传感器时,特异性DNA探针的固定是最关键的环节之一。现有吸附、络合和包埋等策略多适用于普通显微镜玻片,而针对更定制化的表面仍需替代方案。对于金表面,混合DNA/烷硫醇自组装膜是直接将单链DNA探针偶联到表面的常用方法。这些混合膜的质量受多种参数影响,并直接决定传感器的灵敏度与检测限。作者证实所用碳间隔臂长度与DNA生...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2010
Chen B
朊病毒病又称传染性海绵状脑病(TSEs),是一类累及动物和人类的神经退行性疾病,包括绵羊痒病、牛海绵状脑病、鹿慢性消耗病、人类克雅病及变异型克雅病等。疾病进展与细胞朊蛋白(PrPC)转变为蛋白酶抗性、不溶性错误折叠朊蛋白(PrPSc)并形成淀粉样沉积密切相关,因此 PrPC 和 PrPSc 均被视为潜在药物靶点。由于 PrPSc 不...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2010
Schuck P, Zhao H
本章系统介绍表面等离子共振(SPR)生物传感器数据的动力学分析方法,旨在测定固定于传感器表面的配体与溶液中可溶分析物之间生物分子相互作用的亲和力及结合/解离速率常数。作者强调,在解释 SPR 结合曲线时必须明确并严格检验分析模型所隐含的假设,并讨论这些假设对实验设计、数据采集和对照设置的影响。SPR 表面结合动力学偏离理想双分子拟一...
Journal of cancer research and clinical oncology
2010
Kapoor V, Singh AK, Dey S, Sharma SC 等 5 人
本研究旨在定量检测烟草相关口腔癌患者循环中的COX-2水平,并评估COX-2肽抑制剂对KB口腔癌细胞的体外抗肿瘤活性。作者采用新型生物传感器表面等离子共振(SPR)技术,检测76例口腔癌患者和43例正常对照的血清COX-2水平;同时用碘化丙啶(PI)标记流式细胞术、Alamar Blue、MTS和Annexin V结合实验评价5种C...
Talanta
2010
Meneely JP, Sulyok M, Baumgartner S, Krska R 等 5 人
本研究建立了一种基于表面等离子共振(SPR)的快速筛查方法,用于同时检测天然污染谷物及玉米基婴儿食品中的 T-2 毒素和 HT-2 毒素。传感器芯片采用 HT-2 毒素衍生物与单克隆抗体进行竞争性免疫分析。该抗体以 HT-2 为免疫原制备,对 T-2 具有高度交叉反应,而对其他常见单端孢霉烯族毒素无交叉反应。样品经 40% 甲醇简单...